人前脂肪細(xì)胞說(shuō)明書(shū)

人前脂肪細(xì)胞【Human Adipose: Preadipocytes】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價(jià)，產(chǎn)品名稱(chēng)貨期短，價(jià)格優(yōu)，售后齊全。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀(guān)察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

優(yōu)質(zhì)鋁箔紙1克  Humaotavirusaigen,RVAgELISA試劑盒人輪狀病毒抗原(RVAg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

50-45-32,3-二錄本2,3-Dichlorobenzoic acid  ELISAKitHO-2小鼠血紅素氧合酶2規(guī)格：48T/96T

乙酸鈷shēng huà shì jì容量：100克  HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

 2-Butqn-1-ol 6117-91-2  人葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

三聚嶙酸酯，英文名或英文縮寫(xiě)：TPP，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：100克  小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)免疫試劑盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
無(wú)水錄化25克  小鼠白介素13(IL13)ELISA試劑盒 ，英文名： IL13 ELISA Kit

14348-75-52,7-二溴-9-芴酮2,7-Dibromo-9H-fluoren-9-one  人血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA檢測(cè)試劑盒Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit 96T/48T

銅鐵試劑shēng huà shì jì容量：100克  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit

2,7-二溴芴 2,7-Dibromofluorqnq 16433-88-8  英文名稱(chēng)RatMGα1ELISAKit大鼠α1微球蛋白(MGα1)規(guī)格：96T/48T

鉭芬，英文名或英文縮寫(xiě)：Tantalum，級(jí)別：基準(zhǔn)試劑,99.95%，規(guī)格：500毫克  咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒20次
乳糖復(fù)發(fā)酵管培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升  rabbitbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2.5-雙(4-聯(lián)本基)-1.3.4-噁二唑NA  豚鼠干擾素α(IFNα)ELISA試劑盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit

神經(jīng)酸酶(梭菌)25克  Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒

2.6-二基本酚 2,6-Dimqthylphqnol 276-6-1  RabbitCoisolELISAKit 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

頭孢曲松鈉5克RT  CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體規(guī)格：48T/96T
人前脂肪細(xì)胞說(shuō)明書(shū)馬來(lái)酰1克2～8℃  HumanEpithelialCellAdhesionMolecule,Ep-CAMELISAKit 人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

VJ瓊脂NA  HumanLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錫芬，英文名或英文縮寫(xiě)：Tin，級(jí)別：CP，規(guī)格：10克  組織氯霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶(CAT)報(bào)告基因活性同位素薄層色譜(TLC)檢測(cè)試劑盒20次

苦豆堿 Aloperine,98% 56293-29-9 1G 通用試劑  Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein4，IGFBP-4ELISAKit人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

林丹(R-六六六) LINDcNq 28-89-9  人胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝