人胃癌組織提取物培養

人胃癌組織提取物【Cancer: Human Stomach Cancer Derivatives】

胃癌是消化道中常見的惡性腫瘤，按組織結構的不同可以分為粘液癌、腺癌、未分化癌和特殊類型癌四種。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體人胃癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

SMCC0mgTolazoline hydrochloride597鹽酸妥拉唑林

Sulfo-SMCCmgMeclizine hydrochloride142鹽酸美克洛嗪

3-Maleimidopropionic acid N-hydroxysuccinimide ester0mg6-(5-Chloropyridin-yl)-hydroxy,7-dihydroH-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-one41

Fluorescein-maleimide25mg佐匹克隆

Tetramethylrhodamine-(and)-maleimide *Mixed isomers*25mgCapecitabine 2',3'-diacetate162
Emtricitabine  143491-57-0  中文名：恩曲他濱  分子式：C8H10FN3O3S    人Apelin36elisa試劑盒   人Apelin 36試劑盒   規格型號：96T/48T   人Apelin 36試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Dasatinib  302962-49-8  中文名：達沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S    雞白介素4elisa試劑盒   雞白介素4試劑盒   規格型號：96T/48T   雞白介素4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：雞白介素4試劑盒、雞白介素4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Zolpidem    中文名：坦  分子式：C19H21N3O    小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   小鼠泰澤病原體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠泰澤病原體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠泰澤病原體試劑盒、小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4    人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯吸附測定試劑盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  99469-99-5  中文名：  分子式：C13H16O5    人中心體蛋白110(CEP110)酶聯吸附測定試劑盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit
人參炔醇 HPLC≥98% 5mg HISTONEH3蛋白共沉淀分析試劑盒5

人參三醇 HPLC≥98% 20mg HIS標記蛋白Ni-A樹脂再生試劑盒20

人參皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS標記蛋白化試劑盒5

人參皂苷 Rg HPLC≥98% 20mg HIS標記蛋白擴增試劑盒10

人參皂苷CK HPLC≥98% 20mg HIS釣餌(PULLDOWN)檢測試劑盒5

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HMMA高效液相色譜電化學定量檢測試劑盒20

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE細胞膜變檢測試劑盒50

人參皂苷F HPLC≥98% 10mg Hollande固著液50毫升

人參皂苷F HPLC≥98% 20mg HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2

人參皂苷Rb HPLC≥98% 20mg HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2
人胃癌組織提取物培養兔損傷分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA試劑盒     5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit     5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羥甲基糠醛  分子式：C6H6O3  度：%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。