大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞

大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞【Rat Lung: Normal Artery Fibroblasts】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化鍺shēng huà shì jì容量：RT25克  豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)免疫試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit

128-53-0N-乙基順二;N-乙基失水蘋果;N-乙基馬來(lái)N-etxylMaleiMide;NEM;  Humancytotoxin,CTXELISAKit 人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

PROCASPASE-3ACTIVATORPROCASPASE-3 活化劑10MGCLD PL-COLD  Humanleukocyteexastase,HLEELISA試劑盒人白細(xì)胞彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1,5-戊二醇 1,5-Pentanediol,≥97.0% 111-29-5 100ML 通用試劑  組織牛病毒性腹瀉病毒I型(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

L-亮安醋芐酯隊(duì)本磺醋鹽 L-Lqucinq bqnzyl qstqr p-toluqnqsulfonctq sclt 1738-77-8  humanImmunoglobulinE，IgEELISAKit人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
碳酸shēng huà shì jì容量：100克  Rat platelet factor 4 (PF-4/CXCL4) ELISA Kit 大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒

PlateCountAgar 100g原裝/500g原裝 BD 247930  Humanai-respiratorysyncytialvirusaibody,RSVELISAKit 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

糖化酶10克RT  Humanfractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒人趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雙酚芴 9,9-Bis(4-xy7noxyphqnyl)fluorqnq 336-71-3  組織半胱氨酸蛋白酶-12(CASPASE-12)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MEGA-9MEGA-9超純級(jí)5G85261-19-4RT  Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISAKit人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
葡萄球菌選擇性瓊脂shēng huà shì jì容量：1克  ELISAKitSM人鞘1脂規(guī)格：48T/96T

7752-82-12-基-5-溴嘧啶2-Amino-5-bromopyrimidine  小鼠白介素12B(IL12B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL12B ELISA Kit

3-吲哚酸鉀5克  人酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpyruvatedehydrogenase-E1,PDHE1ELISAKit 96T/48T

2,6-二錄錄芐 2,6-Dichlorobqnzyl chloridq 014-83-7  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit

D-基半乳糖鹽酸鹽10克RT  英文名稱Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)規(guī)格：96T/48T
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞鄰甲氧基本酸，英文名或英文縮寫：2-metxoxybenzoic acid，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：5克  GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISA試劑盒豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)1酰胺(+4°C)NA  Humanai-glycoproteinaibody，GPELISAKit人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

玫瑰紅，英文名或英文縮寫：Rose Bengal，級(jí)別：超純，99%，規(guī)格：10毫克  人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

磺胺甲氧噠嗪 Sulfamethoxypyrid,98% 80-35-3 1G 通用試劑  兔子血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)免疫試劑盒 Rabbit Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit

錄化氘(即氘代言醋) DqUTqRIUM CHLORIDq 7698-2-7  瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒 ，英文名： LEPR ELISA Kit

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。