產(chǎn)品名稱 | 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物價(jià)格 | 英文名稱 | Human Lung: Normal Pulmonary Fibroblast Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99000 |
人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物【Human Lung: Normal Pulmonary Fibroblast Cell Derivatives】 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物是從人原代肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取的,人原代肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞從正常人肺動(dòng)脈成纖維組織制備。正常人肺動(dòng)脈成纖維組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 豬日本乙型腦炎病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Physcion 8-O-rutinoside1293931大黃素-O-蕓香糖苷 豬日本乙型腦炎病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Physapruin A1551783 口蹄疫病毒通用型RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Physaminimin C15822593 口蹄疫病毒Asia-I型RT-PCR檢測(cè)試劑盒/Phyperunolide E1192 口蹄疫病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒Phyllostine2729 Phenformin hydrochloride 中文名:鹽酸苯乙雙胍 分子式:C10H16ClN5 中文名稱 方法 規(guī)格 Phenformin 中文名:苯乙雙胍 分子式:C10H15N5 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISAKit Perospirone hydrochloride 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit Periplogenin 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5 大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit Periplocoside O 中文名:北五加皮苷O 分子式:C36H56O10 中文名稱 方法 規(guī)格 重水,氧化氘(50G) Deuterium Oxide 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9% 膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升 重水,氧化氘(100G) Deuterium Oxide 質(zhì)量規(guī)格:D,99.9% 膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升 氘代硫酸(0.55 ml x 10) Sulfuric Acid-D2 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O 酵母/真菌D-葡萄糖含量氧化法定量檢測(cè)試劑盒20 氘代硫酸(50g ) Sulfuric Acid-D2 質(zhì)量規(guī)格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O 酵母/真菌D-葡萄糖激酶法定量檢測(cè)試劑盒20 氘代硫酸(100g ) Sulfuric Acid-D2 質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O 酵母/真菌超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒50 氘代鹽酸(5g ) Deuterium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 酵母5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 氘代鹽酸(5g ) Deuterium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O 酵母DNA損傷彗星*熒光檢測(cè)試劑盒20 氘代鹽酸(10g) Deuterium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 酵母DNA損傷彗星熒光檢測(cè)試劑盒20 氘代鹽酸(10g) Deuterium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O 酵母F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20 氘代鹽酸(50g) Deuterium Chloride 質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 20% IN D2O 酵母NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20(10樣本) 人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞提取物價(jià)格171599-83-0 中文名:枸櫞酸 分子式:C28H38N6O11S HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAKit人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Amlexanox 68302-57-8 中文名:氨來呫諾 分子式:C16H14N2O4 兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Losartan 114798-26-4 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O Human cyclin D1 (Cyclin-D1) ELISA Kit 人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 Glyburide 10238-21-8 中文名:格列本脲 分子式:C23H28ClN3O5S Humanmitoticspindleapparatusaibody,MSAELISAKit 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 Rosiglitazone 122320-73-4 中文名:羅格列酮 分子式:C18H19N3O3S Humancytokeratin17,CK-17ELISA試劑盒人細(xì)胞角蛋白17(CK17)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 |