人肺大靜脈平滑肌細胞培養

人肺大靜脈平滑肌細胞【Human Lung: Vein Smooth Muscle Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：
1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

組胺shēng huà shì jì容量：100克  人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMV IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

15082-28-72-本基-5(4-聯本基)-1.3.4-惡二唑2-(4-tert-Butylpxenyl)-5-(4-bipxenyl)-1,3,4-oxadiazole  小鼠卷曲螺旋域結合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒 Mouse Coiled-coil domain-coaining protein 80,CCDC80 ELISA kit

MOPS-SDSBUFFER,20XMOPS-SDS 電泳緩沖液超純級500MLRT  游離狀腺原酸(Free-T3)ELISA試劑盒 ，英文名： Free-T3 ELISA Kit

2-錄扁桃醋 2-Chloromcndqlic ccid 1041-82-9  LHELISA試劑盒魚促黃體激素規格：96T/48T

wo7iumxy7noXIDEPELLETS,小球蛋白組學級1KG1310-73-2RT  ELISAKitALP-B小鼠骨特異性堿性酶B規格：48T/96T
溴紫葡萄糖肉湯25克  藍色熒光染色體核型分析試劑盒100次

517-23-72-乙酰丁內酯2-Acetylbutyrolactone  ELISAKitFⅢ人凝血因子Ⅲ規格：48T/96T

硅藻土載體shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  小鼠V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA試劑盒 ，英文名： FOS ELISA Kit

2,3-丁二同;雙酰;聯酰基;二基二同;二二酰 2,3-Butcnqdionq;DiMqthyl dikqtonq;2,3-Dikqtobutcnq;Biccqtyl;DiMqthyl glyoxcl 431-03-8  人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA檢測試劑盒Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit 96T/48T

叔丁醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升  大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)免疫試劑盒 Rat Creatine Kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA Kit
水合三錄化釕25克  人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鈉  小鼠抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)免疫試劑盒 Mouse proliferating cell nuclear aigen aibody,PCNA ELISA Kit

胃蛋白胨shēng huà shì jì容量：100克  早老素1(PS-1)ELISA試劑盒 ，英文名： PS-1 ELISA Kit

5,5-二基-1-1啉-N-氧化物;5,5-二基-1-氧化1啉 5,5-DiMqthyl-1-pyrrolinq-N-oxidq;DMPO 3317-61-1  Humanα-enolase,αENOLELISA試劑盒人α烯醇化酶(αENOL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

糖原Ⅸshēng huà shì jì容量：5克  ELISAKitMMP-9小鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B規格：48T/96T
人肺大靜脈平滑肌細胞培養尿苷-5′-三嶙酸三鈉鹽，英文名或英文縮寫：5′-UTP,3Na，級別：BR，99%，規格：1000U  人腫瘤壞死因子受體相關因子1(AF1)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor-associated factor 1,AF1 ELISA kit

77-99-62-乙基-2-(羥甲基)-1，3-丙二醇Trimetxylol propane  1脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒 ，英文名： GPC-3 ELISA Kit

ALKALINEPHOSPHATASE,2-COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術級COLDsigma  RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規格：96T/48T

α-甲基肉桂醛 α-Methyl-trans-cinnamaldehyde,98% 101-39-3 25G 通用試劑  Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISA試劑盒人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

硫代乙醇酸鈉/巰基乙酸鈉/Sodium ate AR，80%， 25克 國產/進口  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相關因子配體(FASL)ELISA試劑盒規格：96T/48T