大鼠脈絡(luò)膜組織提取物培養(yǎng)

大鼠脈絡(luò)膜組織提取物【Choroid: Normal Rat Choroidal Derivatives】

脈絡(luò)膜組織在視網(wǎng)膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細(xì)胞。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠脈絡(luò)膜組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

0bp DNA ladder（0000bp）   0次7α-Hydroxystigmasterol6499897α-羥基豆甾醇

bp DNA ladder（00bp） 0次7α-Hydroxysitosterol3442717α-羥基谷甾醇

bp plus DNA ladder（000bp） 0次7-Oxo-β-sitosterol3447-氧代-β-谷甾醇

D100 DNA ladder（200bp）  0次7-Methoxy-tetralinone68369

D100 plus DNA ladder（200bp）0次7-Methoxy-naphthaleneacetic acid68362
Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  中文名：卡培他濱  分子式：C16H20FN3O7    豬孕（PROG）ELISA試劑盒  

Capecitabine 2',3'-diacetate  中文名：  分子式：C19H26FN3O8    豬孕激素（P）ELISA試劑盒           

Capecitabine  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6    豬脂肪甘油三酯脂酶elisa試劑盒   豬脂肪甘油三酯脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬脂肪甘油三酯脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬脂肪甘油三酯脂酶試劑盒、豬脂肪甘油三酯脂酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Canrenone  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3    豬脂蛋白αelisa試劑盒   豬脂蛋白α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬脂蛋白α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬脂蛋白α試劑盒、豬脂蛋白αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Candesartan methyl ester  中文名：  分子式：C25H22N6O3    豬載脂蛋白B100elisa試劑盒   豬載脂蛋白B100試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬載脂蛋白B100試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬載脂蛋白B100試劑盒、豬載脂蛋白B100eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
氯化飛燕草素O桑布雙糖苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISAKit大鼠脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

槲皮素O葡萄糖酸苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒大鼠脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化失車菊素O桑布雙糖苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒大鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氧鼠尾草酚 HPLC≥95% 20mg Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基柳杉酚 HPLC≥95% 20mg Ratdeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亞甲基丹參醌 HPLC≥95% 20mg RatDesmin,DesELISAKit大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

新隱丹參酮 HPLC≥95% 20mg RatDesmin,DesELISA試劑盒大鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

柳杉酚； 脫氧代黃檜醇 HPLC≥95% 20mg Ratdiamineoxidase,DAOELISAKit大鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羅漢果苷IIe HPLC≥95% 20mg Ratdiamineoxidase,DAOELISA試劑盒大鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

O羅漢果苷III HPLC≥95% 20mg RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit大鼠雙氫睪同(DHT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠脈絡(luò)膜組織提取物培養(yǎng)線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次  2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile  865758-96-9  中文名：  分子式：C13H10ClN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

線粒體復(fù)合物I蛋白共沉淀分析試劑盒5次  2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid  中文名：  分子式：C12H14O3S  度：98.0%

線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次  22-Dehydroclerosteryl acetate  中文名：  分子式：C31H48O2  度：93.0%

線粒體復(fù)合物IV蛋白共沉淀分析試劑盒5次  2-Acetonaphthone  中文名：2'-萘乙酮  分子式：C12H10O  度：98.0%

線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次  2-Allylphenol  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O  度：98.0%