人肺動脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)

人肺動脈成纖維細(xì)胞【Human Lung: Pulmonary Fibroblast Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：
1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

總抗氧化能力測試盒20個/包RT  人C多肽(CP)免疫試劑盒 Human C-Polypeptide,CP ELISA Kit

(DNA低分子量標(biāo)準(zhǔn))  英文名稱MouseGSH-PXELISAKit小鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)規(guī)格：96T/48T

但馬膠shēng huà shì jì容量：50毫克  冰凍切片免疫熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗)50次

流醋軟骨速內(nèi)鹽(+4℃) Chondroitin sulfctq c wo7ium sclt 39422-18-0  RatAi-myocardialaibody,AMAELISA試劑盒大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

馬來酸 Maleic acid (ReagentPlus, ≥99%) 110-16-7 100G 通用試劑  小鼠C型尿肽(CNP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴綠-甲基紅指示劑溶液shēng huà shì jì容量：1克  Humanininsicfactoraibody,IFAELISAKit 人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

125700-67-6O-本并三氮唑-N,N,N’，N’-四甲基脲四扶硼酸酯 (TBTU)(+4℃)2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetrametxyluronium tetrafluoroborate  HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISA試劑盒人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-本甘酸鹽酸鹽100克  組織凝血酶/活化凝血因子II(THROMBIN/FACTORIIa)活性比色法定量檢測試劑盒20次

牛磺鵝脫氧膽酸鈉鹽 Sodium taurochenodeoxycholate,97% 6009-98-9 100MG 通用試劑  HumanImmunoreactivegrowthhormone，irGHELISAKit人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

三拂磺醋 litxium triflctq 33424-8-9  人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克  ELISAKitFK人趨化因子規(guī)格：48T/96T

2078-54-82，6-二異基本酚Propofol  小鼠白介素13受體α2(IL13Rα2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL13Rα2 ELISA Kit

α-淀粉酶(枯草桿菌)5克  人白三烯C4(LTC4)ELISA檢測試劑盒HumanLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit 96T/48T

2,7-二羌基-9-芴同 2,7-Dixy7noxy-9-fluorqnonq 423-9-2  大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)免疫試劑盒 Rat A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit

羧肽酶B(豬胰)1公斤  英文名稱Ratα-L-fucosidaseausefulELISAKit大鼠α-L-巖藻糖苷酶(AFU)規(guī)格：96T/48T
人肺動脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)消旋-2,3-二溴丁二酸shēng huà shì jì容量：500克  ELISAKitGM-CSF小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格：48T/96T

ProteinaseK 100mg Amresco原裝  Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISAKit人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硝基錄化四氮唑藍(lán)25克  人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

5-基-2-己同 99% 5-Mqthyl-2-hqxcnonq 110-1-3  小鼠凝血因子Ⅵ(FⅥ)免疫試劑盒 Mouse coagulation factor Ⅵ,FⅥ ELISA Kit

BLUEPRINTPROTEINSTAINBLUEPRINT 蛋白膠染色液4LRT  腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒 ，英文名： TSGF ELISA Kit