人呼吸道上皮細胞提取物

人呼吸道上皮細胞提取物【Human Airway: Normal Airway Epithelial Cell Derivatives】

人呼吸道上皮細胞提取物是從人原代呼吸道上皮細胞提取的，人原代呼吸道上皮細胞從正常人呼吸道上皮組織制備。正常人呼吸道上皮組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

豬藍耳PRRS抗體快速檢測卡N-Acetylsulfanilyl chloride121-對乙酰胺基

豬口蹄疫FMDV抗體快速檢測卡Exemestane786依西美坦

豬流行性腹瀉PED抗體快速檢測卡Hemapolin426甲基環硫雄醇中間體 E

口蹄疫O型抗體快速檢測卡Formestane5668福美司坦

豬流感抗體快速檢測卡4-Chlorotestosterone acetate8559醋酸氯睪酮
Periplogenin  中文名：杠柳苷元  分子式：C23H34O5  度：98.0%  兔糖化血紅蛋白A1celisa試劑盒   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒   規格型號：96T/48T   兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒、兔糖化血紅蛋白A1c elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Periplocogenin  中文名：  分子式：C28H42O6  度：98.0%  兔胎盤生長因子elisa試劑盒   兔胎盤生長因子試劑盒   規格型號：96T/48T   兔胎盤生長因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔胎盤生長因子試劑盒、兔胎盤生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Wallicoside  中文名：斷節參苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒  

Periplocoside N  中文名：  分子式：C27H44O6  度：98.0%  兔細胞間粘附分子1（ICAM-1）ELISA試劑盒  

Trillin  中文名：延齡草苷  分子式：C33H52O8  度：99.0%  兔透明質酸(HA)ELISA試劑盒
脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸  Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   質量規格：美國進口 英文名稱MousemajorhistocompatibilitycomplexELISAKit小鼠組織相容性復合物(MHC)規格：96T/48T

外消旋2-羥基布洛芬  rac 2-Hydroxy Ibuprofen  質量規格：美國進口 英文名稱MouseMBPELISAKit小鼠髓0脂堿蛋白(MBP)規格：96T/48T

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)  1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  質量規格：美國進口 英文名稱MouseMD2ELISAKit小鼠髓樣分化蛋白-2(MD2)規格：96T/48T

1-含氧的布洛芬  1-Oxo Ibuprofen  質量規格：美國進口 英文名稱MouseMGα1ELISAKit小鼠α1微球蛋白(MGα1)規格：96T/48T

羧酸布洛芬(非對映)  Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers)  質量規格：美國進口 英文名稱MouseMGβ2ELISAKit小鼠β2微球蛋白(MGβ2)規格：96T/48T

外消旋α-羥基布洛芬  rac α-Hydroxy Ibuprofen  質量規格：美國進口 英文名稱MousemicroalbunminuriaELISAKIT小鼠微量白蛋白尿(ALB)規格：96T/48T

(R)-布洛芬  (R)-Ibuprofen  質量規格：美國進口 英文名稱MouseMotilinELISAKit小鼠胃動素(MTL)規格：96T/48T

(S)-布洛芬  (S)-Ibuprofen  質量規格：美國進口 英文名稱MouseNF-kBELISAKit小鼠NF-kB規格：96T/48T

依那普利  Enalapril  質量規格：美國進口 英文名稱MouseniicoxidesyhaseELISAKIT小鼠合成酶(NOS)規格：96T/48T

1,3-二芐基-5-氟尿嘧啶  1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil  質量規格：美國進口 英文名稱MouseNN-T4ELISAKit小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)規格：96T/48T
人呼吸道上皮細胞提取物Sitostenone  1058-61-3  中文名：豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O  度：96.0%  關鍵詞：  蘇里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒           

Sitagliptin phosphate  654671-78-0  中文名：無水磷酸西他列汀  分子式：C16H18F6N5O5P  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠牙本質涎0蛋白   英文名稱：   Mouse Dein Sialophosphoprotein   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DSP

Sitafloxacin  127254-12-0  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3  度：98.5%      小鼠DNA抗體   英文名稱：   Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DNA.Ab

Silodosin  160970-54-7  中文名：西洛多辛  分子式：C25H32F3N3O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠氧化酶   英文名稱：   Mouse Diamine Oxidase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DAO

   171599-83-0  中文名：枸櫞酸  分子式：C28H38N6O11S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠多巴胺受體D1   英文名稱：   Mouse Dopamine receptor D1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   DRD1