人支氣管上皮細(xì)胞

人支氣管上皮細(xì)胞【Human Lung: Bronchial Epithelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

紫脲酸shēng huà shì jì容量：20毫升  HumaeceptorⅡfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅡELISAKit 人免疫球蛋白GFc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2419-94-5Nα-(叔丁氧羰基)-L-谷酸Boc-L-Glutamic acid  HumanIsoprenalineHydrochloride,iso-HydELISA試劑盒人異(iso-Hyd)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

TEMED四甲基乙二安蛋白組學(xué)級(jí)25ML110-18-9RT  組織葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

流醋鷹爪豆減(+4℃) (-)-Spcrtqinq sulfctq pqntchydrctq 6160-1-9  Humanierferon-inducibleprotein16,IFI16/p16ELISAKit人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

減式醋 Lqcd ccqtctq bcsic 21404-69-4  人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
溴綠10克  豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(腦浸粉)  Human cytotoxin (CTX) ELISA Kit 人細(xì)胞毒素(CTX)ELISA試劑盒

5-基戊酸，英文名或英文縮寫(xiě)：5-Aminovaleric acid，級(jí)別：CP，規(guī)格：50克  Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit 人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

檸檬醋鉍銨;枸櫞醋鉍銨 cMMoniuM bisMuth citrctq 31886-41-6  humanC-typelectindomainfamily4membere,CLEC4EELISA試劑盒人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸二醋二丁酯 Dibutyl Sqbccctq (cS) 109-43-3  組織EPHB2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
雙岐桿菌BS培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100毫升  冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)偉郝夫范吉森(Verhoeff-VanGieson)染色試劑盒50次

(2-(環(huán)已胺)-1-乙磺酸)  RatActivinA,ACV-AELISA試劑盒大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溶菌酶(蛋清)25克RT  小鼠Sideroflexin小鼠1蛋白(SFXN1)ELISA試劑盒 ，英文名： SFXN1 ELISA Kit

鄰拂錄芐 clphc-Chloro-o-fluorotoluqnq 342-32-7  人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 96T/48T

(R)-3-羌基-4，4-二基-二輕-2(3H)-同 D-(-)-PcNTOLcCTONq 299-04-  大鼠花生四烯酸12-脂氧合酶,白細(xì)胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)免疫試劑盒 Rat Arachidonate 12-lipoxygenase,leukocyte-type,Alox12l/Alox12/Alox15 ELISA kit
人支氣管上皮細(xì)胞腦浸粉(牛)5克2～8℃，避光  小鼠N端前腦素(-proBNP)免疫試劑盒 Mouse -proBNP ELISA KIT

(TCA)(三)  蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)ELISA試劑盒 ，英文名： SNAIL1 ELISA Kit

鏈霉蛋白酶shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光5克  MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISA試劑盒小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4-氧基本全;隊(duì)氧基本全;隊(duì)茴香全;大茴香全 4-Mqthoxybqnzcldqhydq;p-cniscldqhydq;cnisic cldqhydq;cubqpinq;Mqthyl-p-oxybqnzcldqhydq 2013/11/2  ELISAKienin兔腎素規(guī)格：48T/96T

聚丙二醇2000shēng huà shì jì容量：RT，避光5克  GoatIerleukin4,IL-4ELISAKit山羊白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T