小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞【Mouse Lung: Normal Artery Smooth Muscle Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

硬脂酸25克  CLIAKitforbFGF-9(Humanbasicfibroblastgrowthfactor9)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9規(guī)格：48T/96T

2303-1-7間紫;間酚紫;間磺酞M-Cresol purple  細(xì)菌同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量檢測試劑20次

檸檬酸鈉shēng huà shì jì容量：25克  rabbitIerleukin6,IL-6ELISAKit兔子白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

土槿D Pseudolaric acid D (HPLC,≥98%) 115028-67-6 5MG 通用試劑  豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

依思明藍(lán) IscMin bluq;Brillicnt sky bluq 5G;C.I. 42700 134-86-3  Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)ELISA試劑盒
鎢酸鉀500克  人黏著斑激酶(FAK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原裝  小鼠脫氧膠原交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒 Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit

氫氧化鋇shēng huà shì jì容量：RT5克  轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

隊(duì)肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8  HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISA試劑盒人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量：2000u  小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T
肉浸液肉湯培養(yǎng)基25毫升2～8℃  大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒 Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit

(D-果糖)  CLIAKitforVC(HumanVitaminC)ELISAKit人維生素C規(guī)格：48T/96T

固鹽shēng huà shì jì容量：2～8°C50毫克  面食谷氨酰胺比色法定量檢測試劑盒20次

姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP  ELISAKitLTB人淋巴毒素β規(guī)格：48T/96T

苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑  小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 ，英文名： Bcl-2 ELISA Kit
小鼠肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞鋁100毫克  HumanFcregionofimmunoglobulinG,FcγELISAKit人免疫球蛋白GFc片段(Fcγ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2--1-醇(劇毒)Propargyl alcohol  人維生素D3(VD3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

禽膽鹽shēng huà shì jì容量：500克  豬低分子肝素(LMWH)免疫試劑盒 Pig low molecular weight heparin,LMWH ELISA Kit

2,5-二基環(huán);1-羌基-2,5-二基環(huán);六輕隊(duì)二本酚 2,5-DiMqthylcyclohqxcnol;1-xy7noxy-2,5-diMqthylcyclohqxcnq;Hqxcxy7no-p-xylqnol 3809/3/3  HumanIerleukin4,IL-4ELISAKIT 人白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

甲基鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium thiometxoxide，級別：農(nóng)殘級，規(guī)格：100克  HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISA試劑盒人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。