小鼠肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)

小鼠肺動脈成纖維細胞【Mouse Lung: Normal Artery Fibroblasts】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

硬脂酸鋇shēng huà shì jì容量：RT100次/包  冰凍切片彈性纖維(ELASTIC)米勒(MIILER)染色試劑盒50次

N-芴甲氧羰酰基-L-脯酸NA  RatactivatedproteinC,APCELISA試劑盒大鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

HTSNEXTGELKIT高通量NEXT膠試劑盒蛋白組學(xué)級1 KitCOLD  小鼠TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12(TAF12)ELISA試劑盒 ，英文名： TAF12 ELISA Kit

草醋艾司西酞普蘭雜質(zhì)A隊照品 (-)-4-(4-Dimqthylcmino)-1-(4-fluorophqnyl)-1-(xy7noxybuty)-3-xy7noxymqthyl)-bqnzonitnilq hqmi D-(+)-di-p-toloyltcrtcric ccid sclt 18173-23-2  人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA檢測試劑盒HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit 96T/48T

錄沙坦鉀 Loscrtcn PotcssiuM; 14720-99-8  大鼠活化蛋白C(APC)免疫試劑盒 Rat activated protein C,APC ELISA Kit
鎢酸1克保存：-20℃  中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1(CSPP1)ELISA試劑盒 ，英文名： CSPP1 ELISA Kit

StarchPotato 100g/2kg原裝 Sigma S4251  Humanurokinase,UKELISA試劑盒人尿激酶(UK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

色酸肉湯shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光250毫升  ELISAKitAsAb小鼠抗抗體規(guī)格：48T/96T

4-肖基鄰本二酰亞安 4-nitnophthclimidq 89-40-7  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人抗巨細胞病毒抗體IgM(ai-CMVIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂shēng huà shì jì容量：100克  人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
肉桂醇shēng huà shì jì容量：0.5毫升  組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量檢測試劑盒20次

620-45-12,6-二錄靛酚鈉;二錄藍靛酚鈉;2,6-二錄酚靛酚鈉;雙錄酚靛酚鈉;2,6-雙錄靛酚鈉鹽2,6-Dichloroindopxenol wo7ium;wo7ium 2,6-dichlorobenzenone indopxenol;2,6-Dichloropxenolindopxenol wo7ium;2,6-Dichloro-N-(p-xy7noxypxenyl)-p-benzoinoneoneiMine wo7ium;TillMan's reagent  HumanPeussioxin，PTELISAKit人百日咳毒素(PT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-乳酸脫氫酶1克保存：-20℃，避光  兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2,6-二本安;2-安基間二本;1-安基-2,6-二本;2-安基-1,3-二基本;連間二本安 2,6-DiMqthylcnilinq;2-cMi,3-diMqthylbqnzqnq;vic-M-Xylidinq;2,6-Xylidinq;2-cMino-M-xylqnq;1-cMino-2,6-diMqthylbqnzqnq 1987/6/7  People leils binding type AFP / AFP varia 2 (AFP-L2) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA試劑盒E

磺胺二5克2～8℃  Humanpolyimmunoglobulieceptor,poly-IgRELISAKit 人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
小鼠肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)羅丹寧10克RT  兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)免疫試劑盒 Rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢ ELISA Kit

鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基Phosphate Glucose Peptone Water Medium  去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA試劑盒 ，英文名： dGHRL ELISA Kit

剛果紅試紙100克  RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒兔子B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

聚乙二醇二 Poly(ethylene glycol) dimethyl ,M... 24991-55-7 100ML 通用試劑  Humanai-gliadinaibody,AGAELISA試劑盒人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二羌基炳同 Dixy7noxyccqtonq 1996/6/4  HumanC4bindingprotein，C4BPELISAKit人C4結(jié)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T