小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物培養

小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物 【Mouse Airway: Normal Bronchial and Tracheal Epithelial Cell Derivatives】

小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物是從小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取的，小鼠氣管和支氣管上皮細胞從正常小鼠氣管和支氣管組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

腔腸素cp2ug2-Amino'-fluorobenzophenone30/6/4

腔腸素f2 µgEnalapril maleate7956馬來酸依那普利

腔腸素h2 µgPioglitazone hydrochloride1125295鹽酸吡格列酮

腔腸素hcp2 µgAmlodipine besylate11149苯磺酸氨氯地平

腔腸素n2 µgSulfamethoxazole7236磺胺甲噁唑
Medetomidine hydrochloride  86347-15-1  中文名：鹽酸美托咪啶  分子式：C13H17ClN2  度：98.0%  關鍵詞：    豬白介素6elisa試劑盒   豬白介素6試劑盒   規格型號：96T/48T   豬白介素6試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬白介素6試劑盒、豬白介素6 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Mecobalamin  13422-55-4  中文名：甲鈷胺  分子式：C63H91CoN13O14P  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠脫酶(ID)ELISA試劑盒  

Meclizine hydrochloride  1104-22-9  中文名：鹽酸美克洛嗪  分子式：C25H29Cl3N2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒  

Mebendazole  31431-39-7  中文名：甲苯咪唑  分子式：C16H13N3O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠透明質酸結合蛋白(HABP)ELISA試劑盒  

Marsdenoside F  858360-61-9  中文名：  分子式：C39H60O14  度：%  關鍵詞：  通光散; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠透明質酸(HA)ELISA試劑盒
鹽酸多沙普侖  Doxapram hydrochloride  質量規格：美國進口 英文名稱RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規格：96T/48T

琥珀酸多西拉敏-d5  Doxylamine-d5 Succinate  質量規格：美國進口 英文名稱RatMyoglobinELISAKit大鼠肌紅蛋白(MYO)規格：96T/48T

7-氯甲基屈螺酮  7-Chloromethyl Drospirenone  質量規格：美國進口 英文名稱RatMyosinELISAKit大鼠肌球蛋白(Myosin)規格：96T/48T

屈螺酮酸鉀鹽  Drospirenone Acid Potassium Salt  質量規格：美國進口 英文名稱RatMyosinELISAKit大鼠肌球蛋白(Myosin)規格：96T/48T

3,17β-O-二(甲氧甲基)雌二醇  3,17β-O-Bis(methoxymethyl)estradiol  質量規格：美國進口 英文名稱RatneuropeptideYELISAKit大鼠神經肽Y(NPY)規格：96T/48T

4-甲氧基-17β-雌二醇  4-Methoxy-17β-estradiol  質量規格：美國進口 英文名稱RatneuropeptideYELISAKit大鼠神經肽Y(NPY)規格：96T/48T

2-甲酰-3,17β-O-二(甲氧甲基)雌二醇  2-Formyl-3,17β-O-bis(methoxymethyl)estradiol  質量規格：美國進口 英文名稱RatNF-kBELISAKit大鼠NF-kB規格：96T/48T

17-雌二醇  17-Epiestriol  質量規格：美國進口 英文名稱RatniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠合成酶(NOS)規格：96T/48T

2-甲氧基-d3-17β-雌二醇  2-Methoxy-d3-17β-estradiol  質量規格：美國進口 英文名稱RatniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠合成酶(NOS)規格：96T/48T

3-O-甲基雌二醇-d3  3-O-Methyl Estradiol-d3  質量規格：美國進口 英文名稱RatNN-T4ELISAKit大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)規格：96T/48T
小鼠氣管和支氣管上皮細胞提取物 培養大鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  136304-78-4  中文名：  分子式：C22H19N3O2 

大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  136304-78-4  中文名：  分子式：C22H19N3O2  度：98.0%  關鍵詞： 

大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit     Tolvaptan  中文名：托伐普坦  分子式：C26H25ClN2O3 

大鼠 C 反應蛋白 (rat CRP)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 ADI     Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  109837-85-6  中文名：  分子式：C19H34O3 

大量DNA產物化試劑盒   A lot of DNA product purification kit  Axitinib  中文名：阿西替尼  分子式：C22H18N4OS  度：98.0%