人支氣管成纖維細胞說明書

人支氣管成纖維細胞【Human Lung: Bronchial Fibroblast Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(預雜交液)  人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亞嶙酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，級別：BR，95%，規格：100克  大鼠復制蛋白A 70kDaDNA結合亞基(RPA1)免疫試劑盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmi,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原體抗體規格：48T/96T

1,4-氧氮雜環已烷，英文名或英文縮寫：Morpholine，級別：2N，200-300目，規格：25毫克  離子膜通道轉運功能檢測試劑盒20次
溴化亞銅100克  豚鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit

23616-79-7芐基三丁基錄化銨Benzyltributylammonium chloride  Lung resistance protein (LRP) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒

三羥甲基基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 兔子基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

L-賴酸乙酯 L-Lysine ethyl ester dihydrochloride,... 3844-53-9 25G 通用試劑  CLIAKitforBCR(HumanBcellreceptor)ELISAKit人B細胞受體規格：48T/96T

異佛爾同二異青醋酯 isophoronq diisocycnctq 4098-71-9  仙客來*培養基500毫升溶液/片劑
雙(D-葡糖酸)銅，英文名或英文縮寫：Copper gluconate，級別：BR，玉米來源，規格：50克  小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

66-77-31-甲醛;α-甲醛1-Naphthaldehyde;  Human pepsin (Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒

dITP，3Na2'-脫氧次核苷-5'-三嶙酸三鈉鹽5克BR，90%  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3-(2-安基)-安炳基基二氧基硅烷 3-(2-cminoqthylcmino)propyl-dimqthoxymqthylsilcnq 3069-9-  Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISA試劑盒人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

D-Cysteinexy7nochloridemonohydrateD-β-巰基鹽酸鹽5克BR，98%  組織CDK4/CYCLIND激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
人支氣管成纖維細胞說明書奈酚綠B100克  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規格：96T/48T

13446-19-0結晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE  人β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-MANNOSED-甘露糖高純級25G3458-28-4RT  兔子谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit

亞甲基藍 Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑  殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 ，英文名： BPI ELISA Kit

二烯基本(間位和隊位混合物)(含穩定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0  Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒豬髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。