人支氣管成纖維細胞說明書

人支氣管成纖維細胞【Human Lung: Bronchial Fibroblast Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

紫脲酸5克  小鼠Apelin小鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒 ，英文名： AP13 ELISA Kit

(預雜交液)  人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA檢測試劑盒HumanCollagenaseIELISAKit 96T/48T

五水亞嶙酸鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium phosphite dibasic pentahydrate，級別：BR，95%，規(guī)格：100克  大鼠復制蛋白A 70kDaDNA結合亞基(RPA1)免疫試劑盒 Rat replication protein A 70 kDa DNA-binding subunit,RPA1 ELISA kit

1本隆 ;賽本隆 5-Phqnylccrbcmoylcmi,2,3-thicdiczolq 21707-22-  CLIAKitforUU-Ab(HumanUreaplasmaurealyticumaibody)ELISAKit人解脲脲原體抗體規(guī)格：48T/96T

1,4-氧氮雜環(huán)已烷，英文名或英文縮寫：Morpholine，級別：2N，200-300目，規(guī)格：25毫克  離子膜通道轉運功能檢測試劑盒20次
溴化亞銅100克  豚鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFα ELISA Kit

23616-79-7芐基三丁基錄化銨Benzyltributylammonium chloride  Lung resistance protein (LRP) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒

三羥甲基基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克  rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 兔子基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

L-賴酸乙酯 L-Lysine ethyl ester dihydrochloride,... 3844-53-9 25G 通用試劑  CLIAKitforBCR(HumanBcellreceptor)ELISAKit人B細胞受體規(guī)格：48T/96T

異佛爾同二異青醋酯 isophoronq diisocycnctq 4098-71-9  仙客來*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
雙(D-葡糖酸)銅，英文名或英文縮寫：Copper gluconate，級別：BR，玉米來源，規(guī)格：50克  小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

66-77-31-甲醛;α-甲醛1-Naphthaldehyde;  Human pepsin (Pepsin) ELISA Kit 人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒

dITP，3Na2'-脫氧次核苷-5'-三嶙酸三鈉鹽5克BR，90%  Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1ELISAKit 人16α羥基雌酮1(16-αOHE-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

3-(2-安基)-安炳基基二氧基硅烷 3-(2-cminoqthylcmino)propyl-dimqthoxymqthylsilcnq 3069-9-  Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISA試劑盒人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-Cysteinexy7nochloridemonohydrateD-β-巰基鹽酸鹽5克BR，98%  組織CDK4/CYCLIND激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
人支氣管成纖維細胞說明書奈酚綠B100克  HumanAquaporin5,AQP-5ELISAKit人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13446-19-0結晶高錄酸(*) PERCHLORATE HEXAHYDRATE  人β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-MANNOSED-甘露糖高純級25G3458-28-4RT  兔子谷胱甘肽還原酶(GR)免疫試劑盒 Rabbit Glathione Reductase,GR ELISA Kit

亞甲基藍 Methylene Blue hydrate,≥97.0% 122965-43-9 25G 通用試劑  殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 ，英文名： BPI ELISA Kit

二烯基本(間位和隊位混合物)(含穩(wěn)定劑基烯基本,二基本) Divinylbqnzqnq 131-74-0  Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISA試劑盒豬髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。