人體腦靜脈血管組織提取物

人體腦靜脈血管組織提取物【Brain: Normal Human Brain Venous Vascular Derivatives】

腦的靜脈壁薄而無瓣膜，不與動(dòng)脈伴行，可分淺、深靜脈，都注入硬腦膜竇。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體腦靜脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

pP1C.44μg9-Oxooctadeca0,12-dienoic acid542328

pPIC.74μg9-Methoxy-α-lapachone3524

pP1C.3 with DNA Recombinase rxns9-Hydroxy-α-lapachone223338

pP1C.4 with DNA Recombinase rxns9-Hydroxy-androstene,17-dione529-羥基-雄甾烯,17-二酮

pP1C.7 with DNA Recombinase rxns9-Dehydroandrostenedione3599-去氫雄烯二酮
Dronedarone hydrochloride  141625-93-6  中文名：鹽酸決奈達(dá)隆  分子式：C31H45ClN2O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒           

Drevogenin A  10163-83-4  中文名：  分子式：C28H42O7  度：%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit  

Dregeoside Ga1  98665-66-8  中文名：  分子式：C49H80O17  度：93.0%  關(guān)鍵詞：  南山藤; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISAKit  

Dregeoside Da1  98665-65-7  中文名：  分子式：C42H70O15  度：%  關(guān)鍵詞：  南山藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISAKit  

Dregeoside Aa1  20230-41-5  中文名：  分子式：C49H78O17  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  南山藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠肝脂酶(HL)ELISAKit
去甲氧基表鬼臼 HPLC≥98% 20mg MouseDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

,二甲基呫噸酮乙酸 HPLC≥98% 20mg MouseDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA試劑盒小鼠脫氫表雄同酯(DHEA-S)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

,二羥基色原酮 HPLC≥98% 20mg Mousedeoxypyridinoline,DPDELISA試劑盒小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

O甲基維斯阿米醇苷 HPLC≥98% 20mg Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

肌苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg Mousediamineoxidase,DAOELISA試劑盒小鼠氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基甲氧基異黃酮 HPLC≥98% 20mg MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基胞嘧啶 HPLC≥98% 50mg MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISAKit小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鳥苷一二鈉鹽 HPLC≥98% 20mg MouseD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg Mousedopamine,DAELISAKit小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

羥基,二甲氧基黃酮 HPLC≥98% 10mg Mousedopamine,DAELISA試劑盒小鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人體腦靜脈血管組織提取物兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit     Adipic dihydrazide  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2  度：99.0%

兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒     5-O-Ethylcleroindicin D  488138-32-5  中文名：  分子式：C10H16O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit     4-Benzoyloxy-2-azetidinone  28562-58-5  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮  分子式：C10H9NO3 

兔胰淀素(Amylin)ELISAKit     4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  中文名：  分子式：C9H14O4  度：%

兔胰島素樣生長因子1(rabbit IGF-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式：C37H35N3O7  度：98.0%

運(yùn)輸和保存；
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。