苛養(yǎng)木桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：苛養(yǎng)木桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明
英文名稱：Xylella fastidiosa
貨號(hào)：EY-P7367

產(chǎn)品規(guī)格：50T
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分，并將兩個(gè)部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶，反應(yīng)特異性高，*程度地避免了非特異擴(kuò)增；
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化，反應(yīng)靈敏快速，40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘；
3. 抗干擾能力強(qiáng)，反應(yīng)重復(fù)性高，適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
 特異性熒光標(biāo)記：
 TaqMan法
 TaqMan探針的特性：
（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）
（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無熒光， R與Q分開，發(fā)熒光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針
相對(duì)定量通過內(nèi)標(biāo)定量：
內(nèi)標(biāo)（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定，受環(huán)境因素影響小，內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
  1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

 

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

血管通透性測試染液10片/箱  Humancholinephosphoglyceride,PC/CPGELISAKit人膽堿甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

128-09-6錄代丁二N-Chlorosuccinimide  人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

聚乙二醇4000100克RT  兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒 Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit

對(duì)溴苯 4-Bromoanisole,≥99.0% 104-92-7 25G 通用試劑  普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒 ，英文名： CALLA ELISA Kit

諾沙星/呱酸/哌酸/1-乙基-6--1，4-二氫-4-氧代-7-(1-基)-3-羧酸/Norfloxacin BR，99% 1克 國產(chǎn)/進(jìn)口  RabbitIerferonα,IFN-αELISA試劑盒兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
尿素氮測試盒1個(gè)  大鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測試劑盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T

7439-92-1標(biāo)樣Lead  人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit

丁二酸鈉六水合物shēng huà shì jì容量：25克  英文名稱MouseFIIELISAKit小鼠凝血因子II(FII)規(guī)格：96T/48T

玉米蛋白 Zein,≥92.0% 9010-66-6 100G 通用試劑  White*培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

羌安-O-磺醋 xy7noxylcMinq-O-sulfonic ccid 920-43-8  rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒兔子血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
改良淋病奈瑟菌選擇性瓊脂平板1米  人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Tween80 100ml Sigma分裝  小鼠前列腺素E2合成酶(PGES)免疫試劑盒 Mouse prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit

鈣調(diào)神經(jīng)嶙酸酶測試盒shēng huà shì jì容量：300支/包  轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFβR2)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβR2 ELISA Kit

4-拂-3-肖基三拂本 4-Fluoro-3-nitnobqnzotrifluoridq 367-86-  HumaotalproteinS,TPSELISA試劑盒人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二十二烷酸shēng huà shì jì容量：500毫克  ELISAKitES小鼠內(nèi)皮抑素規(guī)格：48T/96T
苛養(yǎng)木桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明TRIS-TAPS-EDTA(TTE)BUFFER,10XTTE緩沖液,DNA測序用超純級(jí)1LRT  HumanProteinCarbonyl，PCELISAKit人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(n-辛基-b-D-葡萄糖苷)  小鼠10kDa熱休克蛋白1(HSP10)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP10 ELISA Kit

DAB，英文名或英文縮寫：DAB substrate TAETS，級(jí)別：AR，規(guī)格：1公斤  人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 96T/48T

Nα-(叔丁氧羰基)-L-谷安醋 Boc-L-Glutcmic ccid 419-94-2  大鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒 Rat proteoglycan 4,PRG4 ELISA kit

酚藏紅花，英文名或英文縮寫：pxenosafranine，級(jí)別：高純，70%，規(guī)格：5克  CLIAKitforxR(Humahioredoxieductase)ELISAKit人硫氧還蛋白還原酶規(guī)格：48T/96T