小鼠肺動脈成纖維細胞提取物說明書

小鼠肺動脈成纖維細胞提取物【Mouse Lung: Normal Artery Fibroblast Derivatives】

小鼠肺動脈成纖維細胞提取物是從小鼠肺動脈成纖維細胞提取的，小鼠肺動脈成纖維細胞從正常小鼠肺動脈組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

七種腹瀉病毒多重PCR快速檢測試劑盒TTriptoquinone A14296

腸道病毒71型(EV71)實時熒光PCR檢測試劑TTrimethoprim73甲氧芐啶

札如病毒/腺病毒/星狀病毒三重實時熒光PCR檢測試劑盒TTrillin141446延齡草苷

諾如病毒GI/諾如病毒GII雙重實時熒光PCR檢測試劑盒TTriethyl 773檸檬酸三乙酯

五種致瀉性大腸埃希氏菌多重PCR檢測試劑盒TTricetyl fingolimod1623589
Meclizine hydrochloride  1104-22-9  中文名：鹽酸美克洛嗪  分子式：C25H29Cl3N2    組織HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  43200-81-3  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2    HumanPlateletassociatedaibody,PA-IgMELISAKit人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒規格：96T/48T

    中文名：佐匹克隆  分子式：C17H17ClN6O3    兔子胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Capecitabine 2',3'-diacetate  162204-20-8  中文名：  分子式：C19H26FN3O8    Human fibronectin (FN) ELISA Kit 人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒

2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6    Humanai-septolysinO,ASOELISAKit 人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
鹽酸多奈哌齊-13C3  Donepezil-13C3 Hydrochloride  質量規格：美國進口 英文名稱Humanlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKit人LFA-3(CD58)規格：96T/48T

5-O-去甲多奈哌齊  5-O-Desmethyl Donepezil  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAkit人巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)規格：96T/48T

二氫多奈哌齊（非對映）  Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophage-DerivedChemokine，MDCELISAKIT人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC)規格：96T/48T

Dehydrodeoxy多奈哌齊（多奈哌齊雜質）  Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit人巨噬細胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)規格：96T/48T

脫氧鹽酸多奈哌齊  Deoxy Donepezil Hydrochloride  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-1β，MIP-1βELISAkit人巨噬細胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)規格：96T/48T

rac (cis/trans)多奈哌齊N-氧化物  rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3α,MIP-3αELISAkit人巨噬細胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)規格：96T/48T

6-O-去甲多奈哌齊  6-O-Desmethyl Donepezil  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageInflammatoryProtein-3β,MIP-3βELISAkit人巨噬細胞炎性蛋白-3β(MIP-3β)規格：96T/48T

脫氫多奈哌齊（多奈哌齊雜質）  Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMacrophageMigRationInhibitoryFactorELISAKit人巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒規格：96T/48T

多佐胺中間體  Dorzolamide intermediate  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-10—MMP-10ELISAkit人基質金屬蛋白酶10(MMP-10)規格：96T/48T

6‘-羥基多沙唑嗪  6'-Hydroxy Doxazosin  質量規格：美國進口 英文名稱HumanMaixmetalloproteinase-13—MMP-13ELISAkit人基質金屬蛋白酶13(MMP-13)規格：96T/48T
小鼠肺動脈成纖維細胞提取物說明書大鼠半胱天冬蛋白酶8   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-8   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-8  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S 

大鼠半胱天冬蛋白酶7   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-7   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-7  3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  中文名：3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式：C2H4N4S  度：98.0%

大鼠半胱天冬蛋白酶3   英文名稱：   active cysteine-aspaic acid protease-3   規格：   48T/96T   英文縮寫：   Active Caspase-3  3-Amino-5-phenylpyrazole  1572-10-7  中文名：3-氨基-5-苯基吡唑  分子式：C9H9N3 

大鼠白三烯C4elisa試劑盒   大鼠白三烯C4試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠白三烯C4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠白三烯C4試劑盒、大鼠白三烯C4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     Trityl candesartan  139481-72-4  中文名：  分子式：C43H34N6O3 

大鼠白三烯B4elisa試劑盒   大鼠白三烯B4試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠白三烯B4試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠白三烯B4試劑盒、大鼠白三烯B4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Trityl candesartan  中文名：  分子式：C43H34N6O3