小鼠肺大動脈內皮細胞提取物

小鼠肺大動脈內皮細胞提取物【Mouse Lung: Normal Artery Endothelial Cell Derivatives】

小鼠肺大動脈內皮細胞提取物是從小鼠肺大動脈內皮細胞提取的，小鼠肺大動脈內皮細胞從正常小鼠肺大動脈組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

偏肺病毒/腺病毒雙重熒光PCR檢測試劑盒48Manidipine dihydrochloride892265鹽酸馬尼地平

新雙重熒光PCR檢測試劑盒48Quetiapine1119749喹硫平

博卡（Boca）/呼吸道合胞（RSV）/偏肺（MPV）病毒三重熒光PCR檢測試劑盒48Gemcitabine9581吉西他濱

冠狀（Hcov）/副流感（PIV）/腺（ADV）病毒三重熒光PCR檢測試劑盒48Mizolastine86125咪唑司汀

乙型流感病毒（IFVB-YA）分型單重熒光PCR檢測試劑盒48Avanafil37847阿伐那非
Marsdenoside F  中文名：  分子式：C39H60O14  度：%  兔固（ALD）ELISA試劑盒  

8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3  度：%  兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒           

Schleicheol 1  中文名：  分子式：C30H52O2  度：%  兔去甲上腺素elisa試劑盒   兔去甲上腺素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔去甲上腺素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Uzarigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H46O8  度：97.5%  兔前列腺素F2aelisa試劑盒   兔前列腺素F2a試劑盒   規格型號：96T/48T   兔前列腺素F2a試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔前列腺素F2a試劑盒、兔前列腺素F2a elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Daturametelin I  中文名：  分子式：C34H48O10  度：93.0%  兔前列腺素E2elisa試劑盒   兔前列腺素E2試劑盒   規格型號：96T/48T   兔前列腺素E2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔前列腺素E2試劑盒、兔前列腺素E2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
鹽酸達克羅寧（標準品）  Dyclonine hydrochloride  質量規格：含量測定 小鼠內皮細胞TEK酪酸激酶(Tie2)ELISA試劑盒 ，英文名： Tie2 ELISA Kit

SGI-1027  SGI1027  質量規格：>98%,DNMT抑制劑 小鼠內皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit

鹽酸己新（標準品）  Bromhexine HCl  質量規格：含量測定 小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒MouseEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 96T/48T

雷西莫特  R848,Resiquimod  質量規格：>98%,TLR7/TLR8激動劑 小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit

羥甲煙胺（標準品）  N-(Hydroxymethyl)nicotinamide  質量規格：含量測定 小鼠內皮型合酶(eNOS)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS ELISA Kit

對氨基水楊酸異（標準品）  Pasiniazid  質量規格：UV法溶出度檢查 小鼠內皮型合酶(NOS3)ELISA試劑盒 ，英文名： NOS3 ELISA Kit

曲匹布通（標準品）  Trepibutone  質量規格：UV法含量測定 小鼠內皮型合酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 ，英文名： eNOS-3 ELISA Kit

曲匹地爾（標準品）  Trapidil  質量規格：供鑒別用 小鼠內皮抑素(ES)ELISA檢測試劑盒MouseEndostatin,ESELISAKit 96T/48T

桂美酸（標準品）  CINAMETIC ACID  質量規格：溶出度檢查 小鼠內皮抑素(ES)ELISA試劑盒 ，英文名： ES ELISA Kit

奧拉米特（標準品）  Orazamide  質量規格：UV法溶出度檢查 小鼠內皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒 ，英文名： EL ELISA Kit
小鼠肺大動脈內皮細胞提取物大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISAKit                 Tofacitinib   540737-29-9  中文名：枸櫞酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8 

大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISAKit     Toltrazuril  中文名：托曲珠利  分子式：C18H14F3N3O4S 

大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit                 Tiotropium bromide  136310-93-5  中文名：噻托溴銨  分子式：C19H22NO4S2 

大鼠補體片斷5a(C5a)ELISAKit                 Tokinolide B  112966-16-2  中文名：  分子式：C24H28O4 

大鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit     Tofacitinib   540737-29-9  中文名：枸櫞酸托法替尼  分子式：C22H28N6O8  度：98.0%

 運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。