人腦動(dòng)脈血管組織提取物說明書

人腦動(dòng)脈血管組織提取物【The Human Brain: Normal Brain Artery Derivatives】

人腦動(dòng)脈血管維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡，合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)，維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。公司科技提供來自新鮮或冷凍人腦動(dòng)脈血管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明；

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運(yùn)輸和保存；

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

PNPP 4-磷酸二鈉   1g/5g Antipyrine0安替比林

Ponceau S 麗春紅S；猩紅S   gTiamulin552975泰妙菌素

Propidium Iodide化丙啶   25mgSulfadiazine685磺胺嘧啶

PVP聚乙烯酮   0g Rifampicin132926利福平

PVPP聚乙烯聚酮   0g Dyphylline4798二羥丙茶堿
Dregeoside Aa1  中文名：  分子式：C49H78O17    豬生長(zhǎng)激素釋放多肽elisa試劑盒   豬生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒、豬生長(zhǎng)激素釋放多肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dregeoside A11  中文名：  分子式：C55H88O22    豬生長(zhǎng)激素elisa試劑盒   豬生長(zhǎng)激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬生長(zhǎng)激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬生長(zhǎng)激素試劑盒、豬生長(zhǎng)激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

D-Pinitol  中文名：D-松醇  分子式：C7H14O6    豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白elisa試劑盒   豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白試劑盒、豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Doxycycline  中文名：多西環(huán)素  分子式：C22H24N2O8    豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3elisa試劑盒   豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3試劑盒、豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Doxifluridine  中文名：  分子式：C9H11FN2O5    豬生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISAKit
去甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽  Demethylchloro Citalopram Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanIL-1ELISAKit人白介素1(IL-1)規(guī)格：96T/48T

3-氧西酞普蘭  3-Oxo Citalopram  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumaninducibleniicoxidesyhaseELISAKIT人誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)規(guī)格：96T/48T

(R)-草酸西酞普蘭  (R)-Citalopram Oxalate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInhibinAELISAKit人抑制素A(INHA)規(guī)格：96T/48T

西酞普蘭N-氧化物  Citalopram N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInhibinBELISAKit人抑制素B(INHB)規(guī)格：96T/48T

(S)-西酞普蘭N-氧化物  (S)-Citalopram N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulieceptorβ(ISR-β)ELISAKIT人胰島素受體β(ISR-β)規(guī)格：96T/48T

N-去甲基克拉霉素  N-Desmethyl Clarithromycin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulinELISAKit人胰島素(Insulin)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

阿糖胞苷 5‘-單鹽  Cytarabine 5'-Monophosphate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

達(dá)卡巴嗪-d6  Dacarbazine-d6  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactor2,IGF-IIELISAKit人胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)規(guī)格：96T/48T

達(dá)沙替尼β-D-葡萄糖苷  Dasatinib β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1ELISAKit人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)規(guī)格：96T/48T

達(dá)沙替尼羧酸  Dasatinib Carboxylic Acid  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP2ELISAKIT人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)規(guī)格：96T/48T
人腦動(dòng)脈血管組織提取物說明書兔脂氧合酶同工酶   英文名稱：   Rabbit Lipoxygenase Isozymes   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   LOXI  5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名：  分子式：C9H12FN3O4 

兔脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit A-FABP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  1068661-35-7  中文名：6,6'- 二芥子?；崽?/span>  分子式：C34H42O19  度：97.0%  關(guān)鍵詞： 

兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒              6,7-Dihydroneridienone A  中文名：  分子式：C21H28O3 

兔脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit     6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  43200-81-3  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒   兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-Aminonicotinic acid  3167-49-5  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2