大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)

大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物【Rat Uterus: Normal Uterus Derivatives】

大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物是從大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取的，大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞從正常大鼠子宮組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氟甲喹殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Chrysophanol4814大黃酚

甲砜霉素殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Chrysophanol 8-O-glucoside132418

恩諾沙星殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Cholesterol578膽固醇

大觀霉素殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Chlorpheniramine maleate1132馬來(lái)酸氯苯那敏

安定殘留酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒Chlorotetracycline572金霉素
Human adeno-associated virus (AAV) ELISA Kit 人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒  1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  中文名：1,4-苯并二氧六環(huán)-6-羧酸  分子式：C9H8O4 

Human adaptor protease activating factor 1 (APAF1) ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒  15,16-Dihydroxyoctadeca-9Z,12Z-dienoic acid  中文名：  分子式：C18H32O4 

Human acylation stimulating protein (ASP) ELISA Kit 人?；碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA試劑盒  17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  中文名：17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮  分子式：C21H28O3 

HumahyroidAibody,TAbELISAKit 人甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%

Humahyroglobulin,TGELISAKit 人甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  1-Methyl-5-amiH-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-73-5  中文名：  分子式：C14H19N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
特比萘芬  Terbinafine   質(zhì)量規(guī)格：>98.5% RatVitaminB6,VB6ELISA試劑盒大鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

特比萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）  Terbinafine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminC,VCELISAKit大鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸特比萘芬  Terbinafine HCl  質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6 RatVitaminC,VCELISA試劑盒大鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸特比萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）  Terbinafine HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminD,VDELISAKit大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

醋酸特立帕肽/重組人甲狀旁腺激素(1-34)  Teriparatide acetate/Human PTH(1-34)  質(zhì)量規(guī)格：>95% RatVitaminD,VDELISA試劑盒大鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

特利加壓素  Terlipressin Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatVitaminD2,VD2ELISAKit大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲砜霉素  Thiamphenicol  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP RatVitaminD2,VD2ELISA試劑盒大鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲砜霉素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Thiamphenicol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminD3,VD3ELISAKit大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胸腺五肽  Thymopentin Acetate  質(zhì)量規(guī)格：>98% RatVitaminD3,VD3ELISA試劑盒大鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸噻加賓   Tiagabine HCl  質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR RatVitaminE,VEELISAKit大鼠維生素E(VE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物培養(yǎng)人阻抑素(PHB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit  3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人足盂蛋白(PCX)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit  3,3-Dimethylacrylic acid  541-47-9  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白elisa試劑盒   人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒、人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  1220891-22-4  中文名：  分子式：C10H10O3 

人總鐵結(jié)合力（TIBC）ELISA試劑盒     3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  3591-19-3  中文名：3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮  分子式：C21H34O3  度：98.0%   

人總前列腺特異抗原elisa試劑盒   人總前列腺特異抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人總前列腺特異抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人總前列腺特異抗原試劑盒、人總前列腺特異抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3,4-Didehydrosapriparaquione  中文名：  分子式：C20H24O3  度：95.0%

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。