大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物

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大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物【Rat Ovaries: Normal Ovaries Derivatives】

大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物是從大鼠原代卵巢顆粒細(xì)胞提取的，大鼠原代卵巢顆粒細(xì)胞從正常大鼠卵巢組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進行下步操作，任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過強從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

呋喃西林代謝物殘留檢測試紙條Bisoprolol fumarate43443富馬酸比索洛爾

呋喃它酮代謝物殘留檢測試紙條Bisdemethoxycucurmin249396雙去甲氧基姜黃素

呋喃妥因代謝物殘留檢測試紙條Bis[4-(dimethylamino)phenyl]methane11雙[4-(二甲氨基)苯基]甲烷

嘔吐毒素殘留檢測試紙條Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone2753雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜

玉米赤霉烯酮殘留檢測試紙條Bis(phenylacetyl) disulfide1888雙(苯乙酰)二硫化物
Horminone  中文名：7α-羥基羅列酮  分子式：C20H28O4  度：97.5%  兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Dihydrotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.5%  兔骨成型蛋白-2(rabbit BMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Tanshinone IIB  中文名：丹參酮IIB  分子式：C19H18O4  度：97.0%  兔骨堿性0酸酶(rabbit BALP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

Tanshinone I  中文名：  分子式：C18H12O3  度：96.0%  兔脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit  

Neoprzewaquinone A  中文名：  分子式：C36H28O6  度：98.5%  兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit
碳酸鈷(II)(>98~102%,BR)  Cobalt (II) carbonate, hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98~102%,BR 酚法DNA萃取試劑盒100

2'-脫氧脫氧胸苷-5'二三鈉鹽  dTDP  質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級 糞便DNA分離+高質(zhì)化試劑盒50

半乳糖氧化酶(酶活：> 30 U/mg，BC)  Galactose oxidase  質(zhì)量規(guī)格：酶活：> 30 U/mg，BC 糞便DNA分離試劑盒50

草酸亞鐵二水(>99%,BR)  Iron (II) oxalate, dihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 糞便DNA高質(zhì)化試劑盒20

氯化鉛(>99%,BR)  Lead (II) chloride  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR 糞便副傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴增檢測試劑盒20

檸檬酸鋰四水(>98%,BR)  Lithium , tetrahydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 糞便副傷寒沙門氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定性試劑盒20

4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷  MU-Gal  質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級 糞便副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴增檢測試劑盒20

4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷  MU-GLU  質(zhì)量規(guī)格：>99%，分子生物學(xué)級 糞便副傷寒沙門氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定性試劑盒20

4-甲基傘花基鈉三水  MUP, di salt, trihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級 糞便傷寒沙門氏菌(SalmonellaTyphi)定量PCR擴增檢測試劑盒20

1,4-雙(5-苯基-2-噁唑基)苯(>98%,Scint Grade)  POPOP  質(zhì)量規(guī)格：>98% 糞便傷寒沙門氏菌(SalmonellaTyphi)定性試劑盒20
大鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物人組織蛋白酶Kelisa試劑盒   人組織蛋白酶K試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶K試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶K試劑盒、人組織蛋白酶K elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%

人組織蛋白酶K(cath-K)ELISAKit     Thiamphenicol  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S 

人組織蛋白酶Delisa試劑盒   人組織蛋白酶D試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組織蛋白酶D試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人組織蛋白酶D試劑盒、人組織蛋白酶D elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     3',5'-Anhydrothymidine  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4 

人組織蛋白酶D(cath-D)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織蛋白酶B(cath-B)ELISA試劑盒     3',5'-Anhydrothymidine  7481-90-5  中文名：3',5'-脫水胸苷  分子式：C10H12N2O4

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。