產(chǎn)品名稱 | 小鼠滑膜細(xì)胞提取物價(jià)格 | 英文名稱 | Mouse Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives | 貨號(hào) | EYX99132 |
小鼠滑膜細(xì)胞提取物【Mouse Bone Joint: Normal Synovial Cell Derivatives】 小鼠滑膜細(xì)胞提取物是從小鼠滑膜細(xì)胞提取的,小鼠滑膜細(xì)胞從正常小鼠滑膜組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 諾氟沙星 ELISA試劑盒96TMethyl 2-ethoxybenzimidazole-carboxylate10587 金霉素 ELISA試劑盒96TMethyl 2-bromomethyl-nitrobenzoate984757 賽庚啶 ELISA試劑盒96TMethyl 2,2-dithienylglycolate264475 特布他林 ELISA試劑盒96TMethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-yl)methyl)amino)-nitrobenzoate1394818 可樂定 ELISA試劑盒96TMethyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]-ethoxyH-benzimidazole-carboxylate1394814 Malic acid 4-Me ester 中文名: 分子式:C5H8O5 豬白介素1elisa試劑盒 豬白介素1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬白介素1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白介素1試劑盒、豬白介素1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Makisterone A 20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C31H50O7 雞極低密度脂蛋白elisa試劑盒 雞極低密度脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 雞極低密度脂蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:雞極低密度脂蛋白試劑盒、雞極低密度脂蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Macranthoin G 中文名:灰氈毛忍冬素G 分子式:C26H26O12 雞5核苷酸酶elisa試劑盒 雞5核苷酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 雞5核苷酸酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:雞5核苷酸酶試劑盒、雞5核苷酸酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Lynestrenol 中文名:利奈孕醇 分子式:C20H28O 豬超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit Lurasidone 中文名:魯拉西酮 分子式:C28H36N4O2S 豬性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit 鹽酸奧昔布寧 Oxybutynin HCl 質(zhì)量規(guī)格:Purity>99.0%;毒蕈堿型乙酰膽堿受體拮抗劑 大米蛋白生物萃取試劑盒20 鹽酸奧昔布寧(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxybutynin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大米淀粉化學(xué)萃取試劑盒20 鹽酸帕羅西汀 Paroxetine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,半水合物 大米淀粉生物萃取試劑盒20 鹽酸帕羅西汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Paroxetine HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠(EPI)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T 吡羅昔康 Piroxicam 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP grade 大鼠(EPI)試劑盒 Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit 吡羅昔康(標(biāo)準(zhǔn)品) Piroxicam 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠(HYD)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHydrocoisone,HYDELISAKit 96T/48T 泊沙康唑 Posaconazole 質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠(HYD)試劑盒 Rat Hydrocoisone,HYD ELISA Kit 泊沙康唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Posaconazole 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠(NO)試劑盒 Rat niic oxide,NO ELISA Kit 利福昔明 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠0蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)試劑盒 Rat PAG1 ELISA kit 利福昔明(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠0酸化Tau蛋白(pMAPT/pTAU)試劑盒 Rat phosphorylated microtubule-associated protein tau,pMAPT/pTAU ELISA kit 小鼠滑膜細(xì)胞提取物價(jià)格大鼠血小板生成素(TPO)ELISAKit Periplocoside M 116782-73-1 中文名:北五加皮苷M 分子式:C34H52O9 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 度:98.0% 大鼠纖溶酶原激活物抑制物elisa試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠纖溶酶原激活物抑制物試劑盒、大鼠纖溶酶原激活物抑制物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 大鼠維生素C(VC)ELISAKit Tolvaptan 150683-30-0 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。 |