我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | 大鼠結腸上皮細胞培養 | Rat Colon: Normal Colon Vein Endothelial Cells | EYX98932 |
大鼠結腸上皮細胞【Rat Colon: Normal Colon Vein Endothelial Cells】 產品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時的穩定。在公司部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 細胞培養方法: 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項: 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。 氧化硅(II),英文名或英文縮寫:Silicon monoxide,級別:AR,98%,規格:25克 髓鞘堿性蛋白抗體(MBP aibody)ELISA試劑盒 ,英文名: MBP aibody ELISA Kit BeefExtract 500g原裝/500g BD211520/國產 MouseVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISA試劑盒小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒規格:96T/48T TRIS1.0MPH10.0STERILETris溶液超純級250ML77-86-1RT FishCoisolELISA試劑盒魚類皮質醇(Coisol)ELISA試劑盒規格:96T/48T 啊摸西林(2-8°C) cmoxicillin 6787-78-0 HumanangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit人血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規格:96T/48T 金屬5克AR,95% 人型肝炎病毒(HCV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 梭菌蛋白酶,英文名或英文縮寫:Clostripain from Clostridium histolyticum,級別:BR,規格:100毫克 Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISAKit人葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T 80-48-8對磺酸metxyl p-toluesulfonate 人纖溶酶原激活劑(PLGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 io7ine/精/粒/io7ine20毫升AR,99% 豬甲狀腺素(T4)免疫試劑盒 Pig Thyroxine,T4 ELISA Kit 3,5-二溴本加醋 97% 3,5-Dibromobqnzoic ccid 618-28-6 HumanMaixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAkit 人基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 Hexaamminecobalt(III)chloride六基錄化鈷5克3N HumanMucin-7,MUC7ELISA試劑盒人粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒規格:96T/48T 葡聚糖T750毫克 Humanhepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒人肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T 526-75-02,3-兒價分2,3-DImetxYLpxenOL PESTANAL 組織胱氨酸(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次 銀絲shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 Humanlymphotoxinα,LTAELISAKit人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 1,4-丁炔二醇 2-Butynq-1,4-diol 110-62-6 人周期素依賴性激酶5(CDK-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 硬脂酸丁酯,英文名或英文縮寫:TECH,級別:AR,99%,規格:1克 Three people of free iiodothyronine (Free-T3) ELISA Kit 人游離*狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒 大鼠結腸上皮細胞培養亮藍1克 Humanai-septolysinO,ASOELISAKit人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)ELISA試劑盒規格:96T/48T (溴綠) 人肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 增塑劑DIBP,英文名或英文縮寫:DIBP,級別:BR,98%,規格:25克 小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒 Mouse heat shock protein 60,hSP-60 ELISA Kit 聚(二基硅氧烷),雙(3-安基炳基)封端 cMINOPROPYL TqRMINcTqD POLYDIMqTHYLSILOXcNq 10614-84-0 總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒 ,英文名: tPSA ELISA Kit 二芐基流迷 Dibqnzyl sulphidq 238-74-9 Humahyroxine,T4ELISA試劑盒人甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 注意事項: 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 |