小鼠腎小管上皮細胞提取物【Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives】 小鼠腎小管上皮細胞提取物是從小鼠原代腎小管上皮細胞提取的,小鼠原代腎小管上皮細胞從正常小鼠腎小管組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 小鼠腎小管上皮細胞提取物 | 英文名稱 | Mouse Kidney: Normal Renal Tubular Derivatives | 貨號 | EYX99135 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 牛支原體抗體 ELISA檢測試劑盒1922-Amino-N-(2-chloro-methylphenyl) thiazole-carboxamide29644 感抗體ELISA檢測試劑盒96Dabigatran etexilate2119156 新城疫抗體ELISA檢測試劑盒96Ethyl 3-(3-amino-(methylamino)-N-(pyridin-yl)benzamido)propanoate2123226 小反芻獸疫病毒抗體ELISA檢測試劑盒192N-(4-Cyanophenyl)glycine422886 羊口蹄疫亞I型抗體ELISA檢測試劑盒192Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-yl)methyl]-ethoxyH-benzimidazole-carboxylate1394814 Makisterone A 20,22-monoacetonide 245323-24-4 中文名: 分子式:C31H50O7 度:% 關鍵詞: 小鼠金屬硫蛋白 英文名稱: Mouse Metallothionein 規格: 48T/96T 英文縮寫: MET Macranthoin G 159934-13-1 中文名:灰氈毛忍冬素G 分子式:C26H26O12 度:97.0% 關鍵詞: 抗氧化; 灰氈毛忍冬; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠尿微量白蛋白 英文名稱: Mouse Microalbunminuria 規格: 48T/96T 英文縮寫: MAU Lynestrenol 52-76-6 中文名:利奈孕醇 分子式:C20H28O 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠黏膜選擇素黏附分子1 英文名稱: Mouse Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule 1 規格: 48T/96T 英文縮寫: MADCAM-1 Lurasidone 367514-87-2 中文名:魯拉西酮 分子式:C28H36N4O2S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA試劑盒 Loxoprofen 68767-14-6 中文名:洛索洛芬 分子式:C15H18O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠鐵調素(Hepcidin)ELISA試劑盒 鹽酸艾司洛爾(標準品) Esmolol HCl 質量規格:>98%,標準品 人骨退化特異標志物(CTX-2)試劑盒 Human CTX-2 ELISA Kit 鹽酸艾司洛爾 Esmolol HCl 質量規格:>99%,BR 人骨涎蛋白(BSP)試劑盒 Human bone sialoprotein,BSP ELISA Kit H-Met-OtBu.HCL H-Met-OtBu·HCl 質量規格:0.98 人骨形成蛋白4(BMP4)試劑盒 Human BMP4 ELISA Kit 麥芽糖醇 Maltitol 質量規格:>98% 人骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 Human BMP-6 ELISA Kit L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽 L-Threonine methyl ester hydrochloride 質量規格:0.98 人骨織素(Ostn)試劑盒 Human osteocrin,Ostn ELISA kit N-乙酰-L-色氨酸乙酯 Ac-Trp-Oet 質量規格:HPLC>98%,BR 人瓜氨酸試劑盒 Human Ciulline ELISA Kit N-乙酰-DL-色氨酸 N-Acetyl-DL-tryptophan 質量規格:0.98 人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)試劑盒 Human AGMAT ELISA Kit N-甲酰-DL-色氨酸 Nalpha-Formyl-DL-tryptophan 質量規格:0.98 人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA檢測試劑盒HumanoligomericproteinELISAKit 96T/48T L-酪氨酸叔丁酯 L-Tyrosine tert-butyl ester 質量規格:>98%,BR 人胱硫醚β-合酶(CBS)試劑盒 Human cystathionine β-syhase,CBS ELISA Kit O-芐基-L-酪氨酸 O-Benzyl-L-tyrosine 質量規格:0.98 人胱天蛋白酶1(Casp-1)試劑盒 Human Caspase 1,Casp-1 ELISA Kit 小鼠腎小管上皮細胞提取物凋亡相關因子 英文名稱: apoptosis-inducing factor Fas 規格: 48T/96T 英文縮寫: Fas Cleroindicin C 183626-28-0 中文名: 分子式:C8H12O3 淀粉酶 b 1-42(Amyloid b 1-42) 作用: ELISA 規格: 96T 德國 IBL Methylprednisolone 83-43-2 中文名:甲基潑尼松龍 分子式:C22H30O5 淀粉含量測試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Propranolol hydrochloride 中文名:鹽酸普萘洛爾 分子式:C16H22ClNO2 氮快速測試盒 niogen rapid test case Physapruin A 155178-03-3 中文名: 分子式:C28H38O7 氮快速測定試劑盒 niogen rapid determination kit Physapruin A 中文名: 分子式:C28H38O7 |