大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物【Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives】

大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠原代腎成纖維細(xì)胞提取的，大鼠原代腎成纖維細(xì)胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

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細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

實(shí)驗(yàn)事項(xiàng)：

1. 試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說(shuō)明書(shū)要求保存試劑。  實(shí)驗(yàn)操作中請(qǐng)使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本 / 標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，前一個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育"時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作，任何時(shí)侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請(qǐng)手甩幾下或少時(shí)離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液、檢測(cè)溶液B工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。請(qǐng)確配置標(biāo)準(zhǔn)品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測(cè)溶液A時(shí)，一次不要小于10μl)，以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成的濃度誤差；請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A工作液或檢測(cè)溶液B工作液。
6.  反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)，避免反應(yīng)過(guò)強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請(qǐng)避光保存，在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
    建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項(xiàng)：

1. 接收到，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

對(duì)蝦傳染性肌肉壞死病毒(IMNV)RNA恒溫核酸檢測(cè)試劑盒（不含提取）24T/48TNandrolone undecylate8629十一酸諾龍

對(duì)蝦桃拉綜合癥病毒（TSV）RNA恒溫核酸檢測(cè)試劑盒（不含提取）24T/48TNandrolone phenylpropionate6苯諾龍

對(duì)蝦副溶血性弧菌恒溫核酸檢測(cè)試劑盒（免提取）24T/48TNandrolone laurate2641月桂酸諾龍

蝦肝腸胞蟲(chóng)(EHP)恒溫核酸檢測(cè)試劑盒（免提取）24T/48TNandrolone decanoate30癸酸諾龍

對(duì)蝦白斑綜合癥病毒（WSSV）DNA恒溫核酸檢測(cè)試劑盒24T/48TN-Aminophthalimide18758N-氨基
Glycodeoxycholic acid  360-65-6  中文名：甘氨脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  膽烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠巨噬細(xì)胞趨化蛋白-3   英文名稱(chēng)：   monocyte chemotactic protein 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   MCP-3

Glyceryl hexacosanoate  127098-14-0  中文名：  分子式：C29H58O4  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠M-膽堿能受體結(jié)合力   英文名稱(chēng)：   M—cholinoceptor binding capacity   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   MCBC

Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1  中文名：  分子式：C29H58O5  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠酸性0酸酶elisa試劑盒   小鼠酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Glycerol  56-81-5  中文名：甘油  分子式：C3H8O3  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Glyburide  10238-21-8  中文名：格列本脲  分子式：C23H28ClN3O5S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠Ⅰ型膠原N末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原N末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
酸性藍(lán)40(>50%,BS)  Acid blue 40  質(zhì)量規(guī)格：>50%,BS 猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T

酸性品紅6B(>50%,BS)  Acid Red 6B  質(zhì)量規(guī)格：>50%,BS 猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeyai-livercellmembraneaibody,LMAELISAKit 96T/48T

B1(>98%,BR)  Aflatoxin B1 from Aspergillus flavus  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeySolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T

B2(>98%,BR)  Aflatoxin B2  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T

G1(>98%,BR)  Aflatoxin G1  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 猴胰島素(INS)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyInsulin,INSELISAKit 96T/48T

G2(>98%,BR)  Aflatoxin G2  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T

茜素黃R鈉鹽  Alizarin yellow R ,  salt  質(zhì)量規(guī)格：Ind Grade 猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

D-阿洛糖(>98%,BR)  ALL, D-Allose  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 猴腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKIT 96T/48T

α-D-葡萄糖-1--二鈉(>99.0%,BR)  alpha-D-Glucose-1-phosphate, di salt, hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR 呼吸鏈依賴(lài)性化線(xiàn)粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒20

α-甲基肉桂酸(>98%,BR)  alpha-Methylcinnamic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 呼吸鏈依賴(lài)性化線(xiàn)粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)熒光測(cè)定試劑盒20
大鼠腎成纖維細(xì)胞提取物瑞-吉染色劑   100ml  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO  度：98.0%   

軟水硬度測(cè)定試劑盒   Water hardness determination kit  Physapruin A  155178-03-3  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  關(guān)鍵詞：  毒性; 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

軟骨糖蛋白 39(YKL-40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Ondansetron  99614-02-5  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

乳鐵蛋白（ Lactoferrin ）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  3-Amino-2-naphthoic acid  5959-52-4  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%   

乳糖   100g  3-Amino-2,6-piperidinedione hydrochloride  24666-56-6  中文名：  分子式：C5H9ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：