大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運(yùn)輸和保存：

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化發(fā)酵試驗(yàn)(OF)培養(yǎng)基25克  HumanBone-specificAlkphaseB,ALP-BELISAKit 人骨特異性堿性酶B(ALP-B)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

666-52-4氘代-D6eetonE-D6  HumanCarcinoembryonicFerritin,CEFELISA試劑盒人癌胚鐵蛋白(CEF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

堿性嶙酸酶測試盒shēng huà shì jì容量：500支/包  重組腺病毒效價(jià)溶斑測定試劑盒20次

O-乙酰-L-絲酸鹽... O-Acetyl-L-serine hydrochloride 66638-22-0 100MG 通用試劑  HumanSolubleClusterofdiffereiation40ligand，sCD40LELISAKit人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

肌醇;環(huán)六烷醇 Inositol;Mqso-Inositol;Cyclohqxitol;Mqct sugcr;Cyclohqxcnqhqxol;Hqxcxy7noxycyclohqxcnq;Mqsoinositq;PhcsqoMcnnitq 87-89-8  小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-2 ELISA Kit
隨機(jī)引物，英文名或英文縮寫：Random primers，級(jí)別：BR，40u/ul，規(guī)格：500克  RatapoproteinB100,apo-B100ELISA試劑盒大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9010-41-7曲拉通 X200wo7ium ALKYLARYLPOLY SULFONATE  Humanc-mycOncogeneproduct,c-mycELISA試劑盒人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BROMOCRESOLGREENFREEACID溴綠ACS級(jí)淡棕色粉末RTsigma  Humanepidermalkeratin,EKELISAKit人表皮角蛋白(EK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5--2-甲基 5-Fluoro-2-methyl,96% 22062-53-9 1G 通用試劑  牛腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鈷/亞鈷/七水鈷/赤礬/Cobalt sulfate heptahydrate AR，99.5%， 100克 國產(chǎn)  人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)免疫試劑盒 Human activating anscription factor-1,ATF-1 ELISA Kit
葡聚糖T4shēng huà shì jì容量：25U  Humanangiotensinogen,aGTELISA試劑盒人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

117-84-0鄰本二二正辛酯;本二二辛酯;鄰酞酸二正辛酯Di-n-octyl o-phthalate;DOP  HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor,BAFF-RELISAKit人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

維生素B5shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100U  人β2受體抗體(β2-AR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-溴茴香硫醚 2-Bromothioanisole,97% 19614-16-5 1G 通用試劑  兔子雌二醇(E2)免疫試劑盒 rabbit Esadiol,E2 ELISA Kit

鄰本二加醋二本酯 DIPHqNYL PHTHcLcTq 1984/6/8  乳清酸核糖轉(zhuǎn)移(OP)ELISA試劑盒 ，英文名： OP ELISA Kit
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞兩性霉素Bshēng huà shì jì容量：RT100克  HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISAKit人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

9025-56-3半纖維素酶(-20℃)HEMICELLULASE  人酸激酶(PK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

葡聚糖凝膠S-1000SF75KU  豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒 Guinea Pig Ierleukin 1 receptor aagonist, IL-1ra ELISA kit

植酸鈣 PHYTIN 3615-82-5 25G 通用試劑  酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒 ，英文名： AIF ELISA Kit

間本二酚藍(lán);樹脂酚藍(lán);類石蕊 LccMoid;C.I. 51400 449-61-6  Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T