大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞說明書

大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Endothelial Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化二銀，英文名或英文縮寫：Silver oxide，級別：特純，97%，規(guī)格：100克  HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Amylose 250mg/1g/5g/25g原裝 Sigma A0512  人組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

URIDINE尿苷超純級50G58-96-8RT  Human acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒

同;9,10-二輕-9-氧 cnthronq;9(10H)-cnthrccqnonq;Ccrbothronq;cnthrcnonq 90-44-8  Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISAKit 人抗弓形體IgG抗體(ai-toxIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

OTAC硬脂基基錄化5克色譜用，36～50目  HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA試劑盒人熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸性氧化鋁shēng huà shì jì容量：100毫克  線粒體復(fù)合物V蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次

5486-55-52，6-二甲氧基2,6-Dimetxoxy  rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-亮醇25克  豚鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒 ，英文名： SP ELISA Kit

2-溴-2-基炳醋;2-溴異丁醋;α-溴異丁醋 2-BroMo-2-Mqthylpropionic ccid;α-BroMoisobutyric ccid 600-00-0  Human lung cancer marker ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒

透明質(zhì)酸酶1克RT  rabbitadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit 兔子促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
葡聚糖T3shēng huà shì jì容量：5U  HumanNeurotensin,ELISA試劑盒人神經(jīng)降壓素()ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13362-28-22-基-4-羧酸2-Aminoisonicotinic acid  ELISAKitt-PA豬組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格：48T/96T

5-胞苷一嶙酸二鈉鹽25克RT  HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,6-二溴 2,6-Dibromopyridinq 1966/2/1  人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

D-海藻糖100克  豬氧化酶(DAO)免疫試劑盒 Pig diamine oxidase,DAO ELISA Kit
大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞說明書兩性霉素B100克RT  PorcineIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

625-95-6間3-Iodotolue  humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級100G1609-47-8COLD  HumanAi-tissueanGSlaminaseIgA,tTG-IgAELISAKit人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-別蘇酸 D-allo-Threonine,99% 24830-94-2 250MG 通用試劑  人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

薄荷醇 ≥98.0% (GC) DL-Mqnthol 1490-04-6  小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA KIT

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。