人食管平滑肌細胞培養(yǎng)

人食管平滑肌細胞【Human Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現(xiàn)貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：
1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

重酸鉀shēng huà shì jì容量：5克  Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酵母氮基礎-無基酸無銨NA  HumanAquaporin1,AQP-1ELISAKit人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二乙酸鋁，英文名或英文縮寫：Aluminum acetate basic，級別：AR，規(guī)格：100毫升  人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

玫紅酸 p-Rosolic acid,85% 603-45-2 25G 通用試劑  兔子骨形成蛋白2(BMP2)免疫試劑盒 Rabbit Bone morphogenetic protein 2,BMP2 ELISA kit

DL-柏安醋 DL-2-cmino-4-mqthylpqntcnoic ccid 38-39-  沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 ，英文名： CPAF ELISA Kit
溴化鎘，英文名或英文縮寫：Cadmium bromide，級別：2N，200目，規(guī)格：1克  人型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(b-環(huán)狀糊精)  豚鼠白介素5(IL-5)免疫試劑盒 Guinea pig ierleukin 5,IL-5 ELISA Kit

URICACID尿酸試劑級25G69-93-2RT  髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 ，英文名： MBP ELISA Kit

兩性電解質 cMPHOLYTq CcRRIqR, PH 5.0-7.0  MouseVitaminB6,VB6ELISA試劑盒小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Malonamide丙二酰胺1克超純，99%  FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
石炭酸復紅shēng huà shì jì容量：100毫克  肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

3469-26-92,7-二甲氧基2,7-Dimetxoxy  Humaetinoblastomatumorsuppressorprotein,pRBELISA試劑盒人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酶(牛肝)1公斤  ELISAKitFDP小鼠血纖蛋白原降解產物規(guī)格：48T/96T

2’，7’-二錄熒光皇 2',7'-DICHLOROFLUORqSCqIN 76-24-0  HumanchemerinELISAKit人chemerinELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

腺苷脫酶1克RT  人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食管平滑肌細胞培養(yǎng)鈉測試盒(帶標準)shēng huà shì jì容量：RT10個  組織二酯酶1(PDE1)活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒10次

7782-92-5基鈉(*)wo7ium amide  HumanIerleukin1βconveingenzyme,ICEELISAKit人白介素1β轉換酶(ICE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

伊文斯藍5克RT，避光  人乙酰肝素酶(HPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

玉米赤霉酮 Zearalanone 5975-78-0 1MG 通用試劑  豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit

異炳醇鑭 98% LcNTHcNUM ISOPROPOXIDq 19446-2-7  HumanforkheadboxO4,FOXO4ELISAKit 人叉頭框蛋白04(FoxO4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝