大鼠腎足突細胞提取物【Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives】 大鼠腎足突細胞提取物是從大鼠原代腎足突細胞提取的,大鼠原代腎足突細胞從正常大鼠腎組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 大鼠腎足突細胞提取物價格 | 英文名稱 | Rat Kidney: Normal Kidney Derivatives | 貨號 | EYX99260 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 動物組織基因提取試劑盒(磁珠法)96 2'-Methylacetanilide16乙酰 病毒RNA提取試劑盒(普通法)2-Acetonaphthone1993/8/32'-萘乙酮 病毒RNA提取試劑盒(過柱法)1'-Acetonaphthone94181'-萘乙酮 RNA裂解液0mlN-Acetoacetylmorpholine166954N-乙酰嗎啉 病毒DNA/RNA提取試劑盒(磁珠法)964'-Methoxyacetoacetanilide54378對乙酰乙酰 Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate) 177602-14-1 中文名: 分子式:C29H58O5 HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 2-C-Methyl-D-erythritol 58698-37-6 中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇 分子式:C5H12O4 HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規格:96T/48T 2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名: 分子式:C8H16O4 組織NADPH氧化酶活性化學發光法定量檢測試劑盒20次(10樣本) Linderaspirone A 1235126-46-1 中文名: 分子式:C34H32O10 HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規格:96T/48T 2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 124111-47-3 中文名: 分子式:C26H52O3 兔子皮質醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 酸性紅88 Acid Red 88 質量規格:AR,進分 人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)ELISA檢測試劑盒Humanmacrophagestimulatingprotein,MSPELISAKit 96T/48T 酸性紅183 Acid Red 183 質量規格:AR,* 人巨噬細胞刺激蛋白(MSP)試劑盒 Human MSP ELISA Kit 酸性紅9 Acid Red 9 質量規格:AR,進分 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 Human M-CSF ELISA kit 孔雀石綠 Malachite green 質量規格:BS 人巨噬細胞集落刺激因子受體(M-CSFR)試劑盒 Human M-CSFR ELISA Kit 燦爛綠,亮綠 Brilliant green 質量規格:BS 人巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒 Human MDC ELISA kit 甲基綠 Methyl Green 質量規格:BS 人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA檢測試劑盒Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit 96T/48T 茜素綠;酸性綠25 Alizarin green 質量規格:BS 人巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 Human MIP-1α ELISA kit 萘酚綠B Naphthol Green B 質量規格:BS 人巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 Human MIP-1β ELISA kit 固綠FCF Fast Green FCF 質量規格:BS 人巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)試劑盒 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 子種綠A;藍A Alphazurine A 質量規格:BS 人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒 Human MIP-3α ELISA kit 大鼠腎足突細胞提取物價格三0酸腺苷酶 英文名稱: Adenosine iphosphate 規格: 48T/96T 英文縮寫: ATP 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole 16691-43-3 中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑 分子式:C2H4N4S 度:98.0% 三0酸脫氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml Amoxapine 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O 度:98.0% 三(羥甲基)基鹽酸鹽 100g 3-Amino-4-methylbenzamide 19406-86-1 中文名:3-氨基-4-甲基苯甲酰胺 分子式:C8H10N2O 度:98.0% 腮腺炎病毒(MuV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 1571-72-8 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 瑞氏-姬姆薩復合染液 Vascular permeability test solion 3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7 中文名:C9H11NO2 分子式:C9H11NO2 度:98.0% |