人體皮膚癌組織提取物【Cancer: Human Skin Cancer Derivatives】 皮膚癌是種發生于皮膚上的惡性腫瘤之一,按病理組織學主要分為基底細胞癌、鱗狀細胞癌、惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤、特發性出血性肉瘤(Kaposi肉瘤)、汗腺癌、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管肉瘤等,其中以基底細胞癌和鱗狀細胞癌為常見。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體皮膚癌組織中高質量的總RNA,PCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院,采集工作根據IRB和HIPAA批準 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 人體皮膚癌組織提取物價格 | 英文名稱 | Cancer: Human Skin Cancer Derivatives | 貨號 | EYX99360 |
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點; 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 Oligo (dT) 18 Primer 0ul4,4'-Bis(α,α-dimethylbenzyl)diphenylamine08174,4'-雙(α,α-二甲基芐基) pd(N)6 隨機六聚體引物 0ul4,4'-Bis(N-carbazolyl),1'-biphenyl5832814,4'-二(9-咔唑) RNase Inhibitor 00U /5×00U 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone3四乙基米氏酮 RTScript All-in-One 1st-Strand cDNA Synthesis Kit 次 4,4'-Bis(chloromethyl)biphenyl1664,4'-雙(氯甲基) 2×DNA連接緩沖液 2×ligation solution MasterMix1ul 4,4'-Bis(5-methyl-benzoxazolyl)stilbene2394,4'-雙(5-甲基-苯并惡唑基)芪 D-Lactosemonohydrate 500g 3-Amino-2,6-piperidinedione hydrochloride 24666-56-6 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 DEPC 100ml Amorolfine hydrochloride 中文名:鹽酸阿莫洛芬 分子式:C21H36ClNO DeoxycholicAcid,Salt 50g Amoxapine 14028-44-5 中文名:阿莫沙平 分子式:C17H16ClN3O CytochromeC,frombovinehea Arillatose B 中文名: 分子式:C22H30O14 CytochalasinB,Helmihosporiumdematioideum Aripiprazole 129722-12-9 中文名:阿立哌唑 分子式:C23H27Cl2N3O2 慶大霉素(標準品) Gentamicin 質量規格:效價測定 小鼠糖0酸異構酶1(TPI1)ELISA試劑盒 ,英文名: TPI1 ELISA Kit 利福霉素SV(標準品) Rifamycin 質量規格:效價測定 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 SL327 SL-327 質量規格:>98%,MEK1/2抑制劑 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA檢測試劑盒Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 96T/48T 麥迪霉素(標準品) Midecamycin 質量規格:效價測定 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 ,英文名: gp130 ELISA Kit 妥布霉素(標準品) Tobramycin Base 質量規格:效價測定 小鼠糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA試劑盒 ,英文名: gp130/CD130 ELISA Kit 制霉素(標準品) Nystatin 質量規格:效價測定 小鼠糖化白蛋白(GA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 磺芐西林(標準品) SULBENICILLIN 質量規格:效價測定 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 乙酰螺旋霉素(標準品) Acetylspiramycin 質量規格:效價測定 小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒 ,英文名: A1c ELISA Kit 三氯氨鉑酸鉀 Potassium trichloroammineplatinate(II) 質量規格:>95% 小鼠糖抗原125(CA125)ELISA試劑盒 ,英文名: CA125 ELISA Kit 西索米星(標準品) Sisomicin 質量規格:效價測定 小鼠糖類抗原125(CA125)ELISA試劑盒 ,英文名: CA125 ELISA Kit 人體皮膚癌組織提取物價格兔子白介素9(IL-9)ELISAKit 6-Chloroguanine riboside 2004/7/1 中文名:6-氯鳥嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4 度:95.0% 關鍵詞: 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit 6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride 84163-13-3 中文名: 分子式:C12H14ClFN2O 兔子白介素6(IL-6)ELISAKit 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone 中文名: 分子式:C14H24O8 度:98.0% 兔子白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone 19131-13-6 中文名: 分子式:C14H24O8 兔子白介素4(IL-4)ELISAKit 6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone 中文名: 分子式:C14H24O8 |