人體膠質瘤組織提取物說明書

人體膠質瘤組織提取物【Cancer: Human Glioma Derivatives】

膠質瘤是發生于神經外胚層的腫瘤，故亦稱神經外胚層腫瘤或神經上皮腫瘤。腫瘤起源于神經間質細胞，即神經膠質、室管膜、脈絡叢上皮和神經實質細胞，即神經元。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體膠質瘤組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

Neutral Red 中性紅   5g(1R,2R)-Amino-inda6613(1R,2R)-氨基-茚醇

Nicotinamide(煙酰胺)   25g(+)-Taddol933799(+),5-雙[羥基(二苯基)甲基],2-二甲基,3-二氧戊環

Nicotinic acid(煙酸)   25g(+)-Noe's reagent8724(+)-核歐沃豪斯效應試劑

Ninhydrin 茚三酮   5g (-)-Phaselic acid42319

NP   0ml (-)-Noe's Reagent319(-)-核歐沃豪斯效應試劑
Dioxopromethazine hydrochloride  15374-15-9  中文名：鹽酸二氧丙嗪  分子式：C17H21ClN2O2S                  

Aspirin  50-78-2  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    兔S100A6蛋白   英文名稱：   Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6   規格：   48T/96T   英文縮寫：   S100A6

Oxytetracycline hydrochloride  2058-46-0  中文名：鹽酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9    兔可溶性細胞間黏附分子1   英文名稱：   Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1   規格：   48T/96T   英文縮寫：   sICAM-1

Flumequine  42835-25-6  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3    兔基質細胞衍化生長因子1a   英文名稱：   Rabbit Somal cell Derived Factor 1a   規格：   48T/96T   英文縮寫：   SDF1a

Valnemulin hydrochloride  133868-46-9  中文名：鹽酸沃尼妙林  分子式：C31H53ClN2O5S    兔超氧化物歧化酶   英文名稱：   Rabbit Superoxide Dismase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   SOD
（標準品）  Hydrocortisone  質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

富馬酸伊布利特  Ibutilide fumarate   質量規格：>99%,BR 大鼠低密度脂蛋白復合物(LDL-IC)ELISA檢測試劑盒RatLDL-ICELISAKit 96T/48T

富馬酸伊布利特(標準品)  Ibutilide fumarate   質量規格：HPLC≥98%,標準品 大鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA檢測試劑盒Rathypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit 96T/48T

硫酸異帕米星  Isepamicine Sulphate  質量規格：含量≥670µg/mg 大鼠抵抗素(Resistin)ELISA檢測試劑盒raesistinELISAKit 96T/48T

蓓薩羅丁;貝沙羅汀  Bexarotene  質量規格：>99% 大鼠疊氮胸苷(AZT)ELISA檢測試劑盒RatAzidothymidine,AZTELISAKit 96T/48T

蓓薩羅丁(標準品)  Bexarotene  質量規格：>99% 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA檢測試劑盒Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit 96T/48T

酮洛芬  Ketoprofen  質量規格：>99%,AR 大鼠多巴胺(DA)ELISA檢測試劑盒Ratdopamine,DAELISAKit 96T/48T

酮洛芬(標準品)  Ketoprofen  質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA檢測試劑盒RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 96T/48T

富馬酸酮替芬  Ketotifen fumarate  質量規格：>99%,BR 大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)ELISA檢測試劑盒Ratdopamineanspoer,DATELISAKit 96T/48T

富馬酸酮替芬(標準品)  Ketotifen fumarate  質量規格：HPLC>98%,標準品 大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒Ratcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T
人體膠質瘤組織提取物說明書兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT     6-Hydroxystigmasta-4,22-dien-3-one  36450-01-8  中文名：  分子式：C29H46O2  度：%  關鍵詞：  豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羥基甲基異茜草素  分子式：C15H10O5  度：97.5%  關鍵詞：  抗氧化; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫

兔子補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒     6-Hydroxyrubiadin  87686-86-0  中文名：6-羥基甲基異茜草素  分子式：C15H10O5 

兔子補體蛋白4(C4)ELISAKit     Adefovir  106941-25-7  中文名：阿德福韋  分子式：C8H12N5O4P 

兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒     6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole hydrochloride  中文名：  分子式：C12H14ClFN2O  度：98.0%

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。