熒光定量PCR試劑盒技術(shù): 本實(shí)用新型技術(shù)公開(kāi)了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
參數(shù)規(guī)格: 產(chǎn)品名稱:羊仰口線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格 英文名稱:Bunostomum trigonocephalum 貨號(hào):EY-P6487 產(chǎn)品規(guī)格:50T 分類:熒光定量PCR試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。 產(chǎn)品特點(diǎn): 本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。 產(chǎn)品特點(diǎn) 1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增; 2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘; 3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。 在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。 特異性熒光標(biāo)記: TaqMan法 TaqMan探針的特性: (1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等 (2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q) (3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開(kāi),發(fā)熒光 (4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針 相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量: 內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。 相對(duì)定量分析方法 : 2-ΔΔCt 前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi) 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值: ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test) ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator) 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值: ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator) 3、計(jì)算表達(dá)水平比率: 2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟: (1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線; (2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。 其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。 步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。 其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。 吲哚酚-β-葡糖苷,英文名或英文縮寫(xiě):Indoxyl-Glucoside,級(jí)別:BR,規(guī)格:10毫克 Mouseai-IgEreceptoraibodyELISA試劑盒小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T DMEM培養(yǎng)基NA ELISAKitCFH小鼠補(bǔ)體因子H規(guī)格:48T/96T D-(+)-TuranoseD(+)松二糖10克BR guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISAKit豚鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 1,3-二(安基炳基)四基二硅氧烷 1,3-BIS(3-cMINOPROPYL)TqTRcMqTHYLDISILOXcNq 469-22-8 人抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 巰基丁二醋 Mqrccptosuccinic ccid 70-49-2 小鼠黃體生成素(LH)免疫試劑盒 Mouse leinizing hormone,LH ELISA kit 水合植酸十二鈉,英文名或英文縮寫(xiě):Phytic acid dodecawo7ium salt hydrate,級(jí)別:CP,98%,規(guī)格:1公斤 Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISA試劑盒倉(cāng)鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 緩沖液PH=4NA Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISAKit人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鄰呋酞,英文名或英文縮寫(xiě):o-Cresolphthalein,級(jí)別:IND,規(guī)格:100毫克 人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 他克莫司 Tacrolimus(HPLC,≥98%) 104987-11-3 20MG 通用試劑 兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ免疫試劑盒 Rabbit mitochondrial respiratory chain complex Ⅱ ELISA Kit 葡糖醋內(nèi)酯 dqltc-Gluconolcctonq 90-80- 嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒 ,英文名: EAR3 ELISA Kit 嶙酸二正丁酯100毫克2~8℃ ELISAKitBRCA-2人癌易感蛋白2規(guī)格:48T/96T 1824-81-32-基-6-甲基,99%2-Amino-6-metxylpyridine 小鼠白介素33(IL-33)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-33 ELISA Kit 三扶乙酰shēng huà shì jì容量:RT1克 大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratplateletfactor3,PF3ELISAKit 96T/48T 2,6-二溴本醌-4-錄亞安 2,6-DIBROMOinoneONq-4-CHLOROIMIDq 237-42-1 人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)免疫試劑盒 Human LAT ELISA Kit 軟海綿酸,英文名或英文縮寫(xiě):OA,級(jí)別:BR,58-60℃,規(guī)格:25克 英文名稱MouseEpinephrineELISAKit小鼠(Epinephrine)規(guī)格:96T/48T 二氧化鉑shēng huà shì jì容量:500毫克 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinB,SP-BELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Dextrin 100g/500g原裝 Sigma D2131 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒 ,英文名: Bcl-xl ELISA Kit 沒(méi)食子酸100毫克 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit 96T/48T 羊仰口線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒價(jià)格姆沙伯 108 CHROMOSORB(R) 108 8902/8/6 人CD5分子(CD5)免疫試劑盒 Human CD5 ELISA Kit 1,4-雙(5-苯基-2-惡... 1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene (... 1806-34-4 5G 通用試劑 英文名稱MouseHIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)規(guī)格:96T/48T |