大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物【Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives】 大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物是從大鼠原代胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取的,大鼠原代胎兒真皮成纖維細(xì)胞從正常大鼠胚胎組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物價格 | 英文名稱 | Rat Embryo: Normal Fetal Dermal Fibroblasts Derivatives | 貨號 | EYX99264 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Decanedioic acid11 多菌靈殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Daucosterol4748胡蘿卜苷 異菌脲殘留酶聯(lián)免疫檢測試劑盒Daturataturin A13331 三唑醇?xì)埩裘嘎?lián)免疫檢測試劑盒Daturataturin A aglycone46651 三唑醇和三唑酮?dú)埩裘嘎?lián)免疫檢測試劑盒Daturametelin I46675 Glaucogenin C mono-D-thevetoside 849201-84-9 中文名: 分子式:C28H40O9 兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 17α-Estradiol 57-91-0 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2 Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒 Stauntosaponin A 1417887-91-2 中文名: 分子式:C28H38O7 Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝 Ergosta-7,22-dien-3-one 32507-77-0 中文名:麥角甾-7,22-二烯-3-酮 分子式:C28H44O HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T Estradiol 50-28-2 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2 組織PKA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 松柏苷 HPLC≥98% 20mg MouseLaminin,LNELISAKit小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 巴利森苷B HPLC≥98% 10mg MouseLaminin,LNELISA試劑盒小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 巴利森苷C HPLC≥98% 10mg MouseLDL-ICELISA試劑盒小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 巴利森苷E HPLC≥98% 5mg MouseLeinizingHormone-ReleasingHormone,LHRHELISA試劑盒小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 白射干素 HPLC≥98% 20mg Mouseleoopichormone,LHELISAKit小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 新異甘草苷 HPLC≥98% 20mg Mouseleoopichormone,LHELISA試劑盒小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鴉膽亭 HPLC≥98% 20mg MouseLeptieceptor,LR/Ob-RELISA試劑盒小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 鴉膽子素A;鴉膽子苦素A HPLC≥98% 20mg MouseLeptin,LEPELISAKit小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 原纖細(xì)薯蕷皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseLeptin,LEPELISA試劑盒小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 偽原纖細(xì)薯蕷皂苷 HPLC≥98% 20mg MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞提取物價格山羊促生長激素釋放激素(GHRH)ELISAKit 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS 度:98.0% 山羊雌三醇(E3)ELISA試劑盒 3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 928165-59-7 中文名: 分子式:C17H25ClO 山羊雌二醇(E2)ELISA試劑盒 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 中文名:3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS 度:98.0% 山羊白介素4elisa試劑盒 山羊白介素4試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 山羊白介素4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素4試劑盒、山羊白介素4 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 中文名: 分子式:C12H12F2O4 度:98.0% 山羊白介素4(IL-4)ELISAKit 3-Benzoylthiazolidine-2-thione 中文名:3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮 分子式:C10H9NOS2 度:98.0% |