人體膀胱癌組織源細胞說明書

人體膀胱癌組織源細胞【Cancer: Human Bladder Cancer Derivatives】

膀胱癌是發生于膀胱的癌病類疾病，泛指各種出自膀胱的惡性腫瘤，常見的膀胱癌細胞來自膀胱內面黏膜表皮，是一種移行上皮細胞，貼壁生長，具有無限增殖能力，喪失接觸抑制現象，癌細胞間粘著性減弱。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體膀胱癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

N6-異戊烯基腺嘌呤溶液（2ip）5×1ml2''-O-Acetylsprengerinin C1273

Neomycin solution 新霉素溶液5×1ml2-n-Propyl-methyl-(1-methylbenzimidazole-yl)benzimidazole1526282

Penicillin G Na Solution 青霉素G鈉鹽溶液 mg/ml5×1ml 2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate1587352-萘基N-苯甲?；奖彼狨?/span>

Penicillin-Streptomycin Solution 0×青鏈霉素溶液0ml2-Methylsulfanylpyrimidin(3H)-one575

Penicillin-Streptomycin Solution 青鏈霉素溶液(0×)0ml2-Methylanthraquinone8442-甲基蒽醌
Dimethylolurea  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3    豬水通道蛋白4（AQP4）ELISA試劑盒  

Dihydrotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3    豬瘦素(LEP)ELISA試劑盒  

Dihydrosenkyunolide C  中文名：二氫洋川芎內酯C  分子式：C12H14O3    豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒  

Dihydroisotanshinone II  中文名：  分子式：C18H14O3    豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒           

Dihydroisotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3    豬髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   豬髓0脂堿性蛋白試劑盒   規格型號：96T/48T   豬髓0脂堿性蛋白試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬髓0脂堿性蛋白試劑盒、豬髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
羥乙基纖維素(20000~30000 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質量規格：粘度20000~30000 mpa.s 人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 Human iFABP ELISA Kit

羥乙基纖維素(5500-6500 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質量規格：粘度5500-6500 mpa.s 人超0酸化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)試劑盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit

羥乙基纖維素(40~60 mpa.s)  Hydroxyethyl Cellulose  質量規格：粘度40~60 mpa.s 人超抗原(Sag)ELISA檢測試劑盒Humansupperaigen,SagELISAKit 96T/48T

異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)  Isopropyl β-D-thiogalactoside  質量規格：>98%,BR 人超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒 Human high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit

甘露糖；D-甘露糖  D-Mannose  質量規格：>99%,BR 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)試劑盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit

D-甘露糖(標準品)  D-Mannose  質量規格：HPLC≥98%，標準品 人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit

N-辛?；?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-8)  N-Octanoyl-N-methylglucamine  質量規格：≥97% ,進分 人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA Kit

N-癸酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-10)  N-Decanoyl-N-methylglucamine   質量規格：>98%,BR 人巢蛋白1(NID1)試劑盒 Human Nidogen 1,NID1 ELISA Kit

辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷  n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside  質量規格：>98%,BR 人成骨生長肽(OGP)ELISA檢測試劑盒HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISAKit 96T/48T

D-綿子糖五水；蜜三糖五水  D(+)-Raffinose pentahydrate  質量規格：>98%,BR 人成纖維細胞生長因子10(FGF10)試劑盒 Human FGF10 ELISA Kit
人體膀胱癌組織源細胞說明書兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子催乳素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S 

兔子催乳素elisa試劑盒   兔子催乳素試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子催乳素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒     6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%

兔子催乳素(PRL)ELISAKit                 5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3 

兔子促上腺皮質激素(ACTH)ELISA試劑盒              6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  中文名：6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2