人體腎癌組織源提取物

人體腎癌組織源提取物【Cancer: Human Kidney Cancer Derivatives】

腎癌是發生于腎臟的癌病類疾病，又稱腎細胞癌，腎腺癌，起源于腎小管上皮細胞，可發生于腎實質的任何部位，可分為普通型（透明細胞）腎癌、狀癌和嫌色細胞癌。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體腎癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

MycoplasmaOUT Prevention0μL × 4/0μLBathophenanthroline16621紅菲繞啉

Mycoplasma Detection Kit rxnsBaclofen11347巴氯芬

Bath Cleaner（水浴鍋抑菌劑）Azithromycin dihydrate11777阿奇霉素二水物

Incubator Cleaner4 mLAzilsartan14733阿齊沙坦

Tray Cleaner mLAzathioprine4466硫唑嘌呤
Dihydrotanshinone I  87205-99-0  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.5%  關鍵詞：  抗菌; 細胞毒活性; 丹參; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒  

Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氫洋川芎內酯C  分子式：C12H14O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒  

Dihydroisotanshinone II  260397-58-8  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.0%  關鍵詞：  膠質鼠尾草; 二萜醌; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒   

Dihydroisotanshinone I  20958-18-3  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.0%  關鍵詞：  抗腫瘤; 抗癌; 丹參; 紅根草; 二萜醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠相關血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒           

Digalactosyldiacylglycerol  145033-48-3  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15  度：%  關鍵詞：    小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISAKit
羥乙基磺酸銨鹽  AHES  質量規格：>99% 小鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)ELISA試劑盒 ，英文名： PKIβ ELISA Kit

羥乙基磺酸  HES  質量規格：>80%,粘狀液體 小鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)ELISA試劑盒 ，英文名： PKIγ ELISA Kit

DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸單鈉鹽  DIPSO Mono  質量規格：>98% 小鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA試劑盒 ，英文名： PRG4 ELISA Kit

DIPSO; 3-[N-N-雙(2-羥乙基)氨基]-2-羥基丙磺酸   DIPSO  質量規格：>99% 小鼠蛋白酪酸0酸酶受體H(PTPRH)ELISA試劑盒 ，英文名： PTPRH ELISA Kit

2,3-二巰基丙磺酸鈉  DMPS  質量規格：>95%,一水合物 小鼠蛋白酪酸0酸酶受體O(PTPRO)ELISA試劑盒 ，英文名： PTPRO ELISA Kit

CHPS-Na；3-氯-2-羥基丙磺酸鈉  CHPS-Na  質量規格：>98.5% 小鼠蛋白酶3(PR3)ELISA試劑盒 ，英文名： PR3 ELISA Kit

SBES；2-乙基磺酸鈉   2-bromoethanesulphonate  質量規格：>98.5% 小鼠蛋白酶激活受體2(PAR2)ELISA試劑盒 ，英文名： PAR2 ELISA Kit

BICINE；N,N-二羥乙基甘氨酸  BICINE  質量規格：>99% 小鼠蛋白酶激活受體3(PAR3)ELISA試劑盒 ，英文名： PAR3 ELISA Kit

BES  salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉  BES  Salt  質量規格：>99% 小鼠蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

BES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸  BES free acid  質量規格：>99% 小鼠蛋酸酶(PP)ELISA檢測試劑盒MouseProteinPhosphatase,PPELISAKit 96T/48T
人體腎癌組織源提取物兔子凋亡信號調節激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒              7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  中文名：  分子式：C12H13NO3 

兔子膽固醇酯轉移蛋白(CETP)ELISA試劑盒     7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子膽固醇酯轉移蛋白(CETP)ELISAKit                 9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol  中文名：  分子式：C18H26O3 

兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒     7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3 

兔子單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISAKit     Thevetin B  27127-79-3  中文名：  分子式：C42H66O18  度：97.5%  關鍵詞：

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。