人體卵巢癌組織提取物培養

人體卵巢癌組織提取物【Cancer: Human Ovarian Cancer Derivatives】

卵巢癌是女性器官常見的腫瘤之一，發病率僅次于子和子宮體癌而列居第三位。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體卵巢癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

MOPS   25g/g/0g(R)-Methoxydalbergione46466(R)-甲氧基黃檀醌

MOPSO   25g(R)-Benzyl-oxazolidinone294(R)-芐基-惡唑烷酮

MS干粉培養基不含維生素 Duchefa   L (R)-(+)-Amino-methyl,1-diphenyl-butanol866956(R)-(+)-氨基-甲基,1-二苯基-丁醇

MS干粉培養基含維生素 Duchefa   L (R)-(+),1'-Bi-naphthol185314(R)-(+),1'-聯-萘酚

MTT 噻唑蘭   2mg/ 1g(R)-(-)-Benzyl-propionyl-oxazolidinone1316853(R)-(-)-芐基-丙酰基-惡唑烷酮
Dihydrosenkyunolide C  195142-72-4  中文名：二氫洋川芎內酯C  分子式：C12H14O3    兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Glyceryl hexacosanoate  127098-14-0  中文名：  分子式：C29H58O4    Rat heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒

Digalactosyldiacylglycerol  145033-48-3  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15    HumanProinsulin,PIELISAKit 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  122475-42-7  中文名：  分子式：C18H24N4O18    HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(DPD)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Senkyunolide G  94530-85-5  中文名：洋川芎內酯G  分子式：C12H16O3    組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次
羥基豨薟精醇 HPLC≥98% 5mg Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

氧代beta谷甾醇 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1 beta (SDF-1 beta /CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒

氧代扁柏脂素 HPLC≥98% 5mg Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒

乙酸,二羥基雙氫黃酮酯 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor / mast cell growth factor (SCF/MGF) ELISA Kit 大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒

異戊烯氧基gamma花椒堿 HPLC≥98% 5mg Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒

(),異海松二烯,二醇 HPLC≥98% 5mg Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA試劑盒

羥基蓽澄茄烯酮 HPLC≥98% 5mg Rat telomerase (TE) ELISA Kit 大鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒

Alfa鐵杉脂素 HPLC≥98% 5mg Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端補體復合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA試劑盒

Alpha菠菜甾酮 HPLC≥98% 5mg Rat testoterone ELISA Kit (T) 大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒

alpha乳香酸 HPLC≥98% 5mg Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒
人體卵巢癌組織提取物培養高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 

兔子肝細胞生長因子elisa試劑盒   兔子肝細胞生長因子試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子肝細胞生長因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子肝細胞生長因子試劑盒、兔子肝細胞生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2  度：98.0%   

兔子肝細胞生長因子elisa試劑盒   兔子肝細胞生長因子試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子肝細胞生長因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子肝細胞生長因子試劑盒、兔子肝細胞生長因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒     7-Acetoxy-4-methylcoumarin  2747/5/9  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  關鍵詞： 

兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISAKit                 7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  中文名：  分子式：C10H10ClNO

運輸和保存；
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。