產品名稱 | PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒價格 | 英文名稱 | | 貨號 | EYX99727 |
PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作要點; 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 總脂酶測試盒【脂蛋白脂酶(LPL)shēng huà shì jì容量:RT1000支/包 奶品維生素E高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次 (腦心浸液 ELISAKitHLA-G人類白細胞抗原G規格:48T/96T TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超純級1.6LRT 小鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒 ,英文名: APLN ELISA Kit 碳醋銨 cMMoniuM ccronctq (cS);Crystcl cMMonic 206-87-6 人preptinELISA檢測試劑盒HumanpreptinELISAKit 96T/48T 雙炳同炳烯酰安 Diccqtonq ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)ccrylcMidq;N-(1,1-DiMqthyl-3-oxobutyl)-2-propcncMidq 873-97-4 大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)免疫試劑盒 Rat gap junction protein,alpha 1,43kDa(GJA1)ELISA kit 鹽酸三shēng huà shì jì容量:5克 HumanImmunoglobulinA,IgAELISAKit人免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 36546-50-6N-乙酰-L-酪酸乙酯;N-乙酰-L-3-(對羥基本)乙酯N-Acetyl-L-tyrosine etxyl ester;ATEE 人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 D-天冬酸1公斤 豬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit 雌馬酚 Equol,98% 531-95-3 250MG 通用試劑 Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit 人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 乳醋 2-8℃ L-LcCTIC cCID litxium ScLT 7848-80- humanleukocyteimmunoglobulin-likereceptorsubfamilyBmember4,LILRB4ELISA試劑盒人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒規格:96T/48T 糖、醇發酵培養基基礎500克RT rabbitCoicosterone,COELISA試劑盒皮質同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規格:96T/48T 10101-53-8溶液Chromic sulfate HumanAi-keratinaibody,AKAELISA試劑盒人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 葡聚糖凝膠LH-60250毫克 Humancarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit人酶2(CA-2)ELISA試劑盒規格:96T/48T 4-苯 4-Iodoanisole,98% 696-62-8 25G 通用試劑 人NOD樣受體(NLR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 三錄螨醇 Dicofol 112-3- 兔抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒 Rabbit Oncostatin-M,OSM ELISA Kit PrimaCell™人前列腺MatchPair™試劑盒價格瓊脂糖凝膠6Bshēng huà shì jì容量:20KU 大鼠兒茶酚胺(CA)免疫試劑盒 Rat catecholamine,CA ELISA Kit POPSO 25g/100g原裝 Amresco J597 CLIAKitfoX-A2(HumahromboxaneA2)ELISAKit人血栓素A2規格:48T/96T 尿苷二嶙酸葡糖醛酸1克RT 牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒2次 6-錄嘌呤 6-Chloropurinq 1987/4/3 ELISAKitsEM-1人可溶性髓系細胞觸發受體-1規格:48T/96T EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水蛋白組學級1KG6381-92-6RT 小鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL1α1 ELISA Kit 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。 |