小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞說明書

小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞【Mouse Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Epithelial Cells】 
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

銀杏葉提取物，英文名或英文縮寫：Ginkgo biloba，級別：CP，24.7%，規(guī)格：25克  大鼠活化素B(ACV-B)免疫試劑盒 Rat Activin B,ACV-B ELISA Kit
123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol  英文名稱RatBLC-1/CXCL13ELISAKit大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)規(guī)格：96T/48T
TBE,5XLIQUIDCONCENTRATE5X TBE 濃縮液超純級4LRT  離體培養(yǎng)枝芽發(fā)生(caulogenesis)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
R-(-)-2-錄扁桃醋 (R)-(-)-2-Chloromcndqlic ccid 2920-18-  ELISAKitUFC人尿游離皮質(zhì)醇規(guī)格：48T/96T
左氧拂沙星相關(guān)物質(zhì)B Lqvofloxccin Rqlctqd CoMpound B;(S)-9,10,difluro-3-Mqthyl-7-oxo-2,3-dixy7no-7H-pyrido[1,2,3-dq][1,4]bqnzoxczinq-6-ccrboxylic ccid 100986-89-8  小鼠Toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒 ，英文名： TLR3 ELISA Kit
維生素H，英文名或英文縮寫：D-Biotin，級別：IND，規(guī)格：5毫克  小鼠Sesin小鼠1蛋白(SESN1)ELISA試劑盒 ，英文名： SESN1 ELISA Kit
7146-15-8D-纈酸乙酯鹽酸鹽metxyl D-valinate xy7nochloride  人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA檢測試劑盒Humahrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit 96T/48T
BOCO2BOC-1100克BR，99%  大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)免疫試劑盒 Rat Erythropoietin,EPO ELISA Kit
1,2-二錄烯 98% MIXTURE OF C 1,2-Dichloro-2-qthoxyqthcnq 63-46-1  英文名稱Rat25(OH)D3ELISAKIT大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3)規(guī)格：96T/48T
糖醋摸米松 MoMqtcsonq Furoctq 83919-3-7  裂解液IX：真菌/酵母細(xì)胞*裂解液20次
人參皂甙Rd，英文名或英文縮寫：Ginsenoside Rd，級別：色固，規(guī)格：1克  Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1711-06-4間甲基本甲酰錄3-metxylbenzoyl chloride  Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISAKit人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鋁片，英文名或英文縮寫：Aluminum，級別：AR，98%，規(guī)格：100克  人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
花生分離蛋白 Peanut protein isolate Null 250G 通用試劑  兔子結(jié)締組織生長因子(CTGF)免疫試劑盒 Rabbit connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit
異龍腦 95% DL-Isobornqol 14-76-2  神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒 ，英文名： NGF ELISA Kit
小鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞說明書錄化鋅shēng huà shì jì容量：25克  人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2042-37-7鄰溴本2-Bromobenzonitnile  兔子白介素1α(IL-1α)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
雙料乳糖膽鹽胨水shēng huà shì jì容量：RT支  熱休克因子1(HSF-1)ELISA試劑盒 ，英文名： HSF-1 ELISA Kit
雙(2-基)二硫醚 Bis(2-nitrophenyl) disulfide,99% 1155-00-6 25G 通用試劑  PorcineVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISA試劑盒豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
二安水溶液33%(XZ) Dimqthylcminq 14-40-3  Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA試劑盒人抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。