大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說明書

大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞【Rat Coronary：Normal Coronary Artery Endothelial Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

氧化100克  細(xì)菌鎂ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

6921-34-2芐基錄化penzyl xloni7e  Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓1脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

色胺shēng huà shì jì容量：100克  豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-纈酸鹽酸鹽 L-Valine methyl ester hydrochloride,99% 6306-52-1 5G 通用試劑  Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)ELISA試劑盒

醋異炳酯;醋醋異炳酯 Isopropyl ccqtctq 108-1-4  HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
酸性綠5，英文名或英文縮寫：Light green SF yellowish，級(jí)別：AR，40-44.5%，規(guī)格：5克  HumanInsulin,INSELISA試劑盒人胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

硅藻土NNA  組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)免疫捕獲檢測(cè)試劑盒20次

肌球素，英文名或英文縮寫：Myoglobin from einonee skeletal muscle，級(jí)別：BR，2-6u/mg，規(guī)格：25克  humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISAKit人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3(Lgals3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4'-O-甲基補(bǔ)骨脂查... O-Methylbroussochalcone B (HPLC,≥98%) 20784-60-5 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品  人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

拂米松 Flumqthcsonq 132-17-3  Human tumor associated aigen (TAA) ELISA Kit 人腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒
蘋果酸脫氫酶測(cè)試盒(測(cè)組織)shēng huà shì jì容量：100支/包  人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

33864-99-2阿利新藍(lán)Ingrain Blue 1  豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒 Pig Myoglobin,MB ELISA kit

L-蘋果酸5克RT  HumaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAkit 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

四乙酸三鈉 EDTA,3Na,≥98.0% 150-38-9 25G 通用試劑  Humanmyelinbasicproteinaoaibody,MBPELISA試劑盒人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-天冬安醋;L-天冬醋;L(+)天門冬安醋;L(+)安基丁二醋;L(+)安基琥珀醋 L-cspcrtic ccid;L-cspcrcginic ccid;L-cMinobutcnqdioic ccid;L-cMinosuccinic ccid 26-84-8  組織脂肪酸合成酶(fattyacidsyhase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
大鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞說明書聯(lián)大茴香鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：o-Dianisidine dixy7nochloride，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：5克  Humaacrolimus-FK506ELISA試劑盒人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-metxOXYmetxYLDOPA  ELISAKitADRA1A小鼠能a1A受體規(guī)格：48T/96T

ConcanamycinA刀A10毫克BR，150-250u/mg  Humanasialoglycoproteieceptor,AGSPRELISAKit人去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-基己酰錄 2-qthylhqxcnoyl chloridq 760-67-8  人麻疹病毒IgG抗體(MV IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Cephalin嶙酸甘油酯1克CP，99%  小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)免疫試劑盒 Mouse Eotaxin 2 ELISA Kit

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。