小鼠腸微血管細胞提取物培養

小鼠腸微血管細胞提取物【Mouse Intestinal: Normal Intestinal Microvascular Cell Derivatives】

小鼠腸微血管細胞提取物是從小鼠腸微血管細胞提取的，小鼠腸微血管細胞從正常小鼠腸微血管組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

 運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

貓皰疹病毒1型實時熒光PCR檢測試劑盒Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside1714225

兔瘟RT-PCR檢測試劑盒/Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside1714222

支原體PCR檢測試劑盒Ornidazole167732奧硝唑

衣原體實時熒光PCR檢測試劑盒Ophiopogonin D9456194麥冬皂苷D

哺乳動物呼腸孤病毒實時熒光RT-PCR檢測試劑盒Ondansetron996142昂丹司瓊
Levamisole hydrochloride  中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S    豬蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒  

Lenalidomide  中文名：來那度胺  分子式：C13H13N3O3    豬膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒  

Leflunomide  中文名：來氟米特  分子式：C12H9F3N2O2    豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA試劑盒           

L-Dihydroorotic acid  中文名：L-4,5-二氫乳清酸  分子式：C5H6N2O4    豬凋亡相關因子elisa試劑盒   豬凋亡相關因子試劑盒   規格型號：96T/48T   豬凋亡相關因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬凋亡相關因子試劑盒、豬凋亡相關因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

L-Carnosine  中文名：L-肌肽  分子式：C9H14N4O3    豬地塞米松elisa試劑盒   豬地塞米松試劑盒   規格型號：96T/48T   豬地塞米松試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：豬地塞米松試劑盒、豬地塞米松eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。
血紅素(>95%,BR)  Hematin  質量規格：>95%,BR 動物源性食品山羊源試劑盒20

聚乙二醇800  PEG 800  質量規格：BR 動物源性食品鼠源試劑盒20

炔雌醚;炔雌醇環戊醚  Quinestrol  質量規格：USP 動物源性食品鴨源試劑盒20

二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)  Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom  質量規格：比活度：>20 U/mg，BC 動物源性食品羊源試劑盒20

化丙啶(>95% (HPLC),BC)  Propidium iodide  質量規格：>95% (HPLC),BC 動物源性食品豬源試劑盒20

十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade)   dodecylbenzenesulfonate  質量規格：>95%,Tech Grade 動物源性飼料牛源試劑盒20

硅酸鈉九水(>98%，BR)   silicate hydrate  質量規格：>98%，BR 動物源性飼料羊源試劑盒20

5--3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)  Bluo-Gal  質量規格：>98%,BR 動物源性飼料樣品處理試劑盒20

氫二鈉二水  Di hydrogen phosphate dihydrate  質量規格：>99%,BR 動物脂肪組織細胞分離培養試劑盒10

中性蛋白酶  Neutral Protease from Bacillus polymyxa  質量規格：酶活：20萬u/g 動物直腸組織細胞分離培養試劑盒10
小鼠腸微血管細胞提取物培養谷酰胺、谷酸（兩種均可測）   Glamine and glamic acid (two can be measured)                 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  中文名：  分子式：C23H37N3O5 

谷酰胺   英文名稱：   ansglaminase   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TG  p-Nitrohydrocinnamic acid  16642-79-8  中文名：  分子式：C9H9NO4 

谷酸測試盒   Glamate test kit  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  中文名：  分子式：C23H37N3O5  度：98.0%

谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒   谷胱甘肽還原酶試劑盒   規格型號：96T/48T   谷胱甘肽還原酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：谷胱甘肽還原酶試劑盒、谷胱甘肽還原酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  6-Aminoquinoxaline  6298-37-9  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3 

谷胱甘肽還原酶（GR）測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣              Venlaine hydrochloride  99300-78-4  中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2