小鼠主動(dòng)脈組織提取物【Mouse Aorta: Normal Aortic Derivatives】 小鼠主動(dòng)脈其管壁含大量彈性膜和彈性纖維,又稱為彈性動(dòng)脈。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠主動(dòng)脈組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱 | 小鼠主動(dòng)脈組織提取物 | 英文名稱 | Mouse Aorta: Normal Aortic Derivatives | 貨號 | EYX99371 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明; 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存; 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn); 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 L-組氨酸 g/25g(S)-(+)-Benzyl-propionyl-oxazolidinone17118(S)-(+)-芐基-丙酰-惡唑烷酮 MES 25g/g/0g(S)-(-)-Amino-methyl,1-diphenyl-butanol7865(S)-(-)-氨基-甲基,1-二苯基-丁醇 Methyl Green 甲基綠 1g(R,R),6-Bis(4-phenyl-oxazolin-yl)pyridine12824(R,R),6-雙(4-苯基-惡唑啉-基)吡啶 Methylene Blue 次甲基藍(lán)/亞甲基藍(lán)/甲烯藍(lán) g(R,R),6-Bis(4-isopropyl-oxazolin-yl)pyridine1318647(R,R),6-雙(4-異丙基-惡唑啉-基)吡啶 Mineral Oil 石蠟油 礦物油 0ml/0ml 元(R,E)-Deca-ene,6-diyne,8-diol9311164 Dihydroisotanshinone I 中文名: 分子式:C18H14O3 度:98.0% 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 4-Hydroxysapriparaquinone 中文名: 分子式:C20H26O4 度:% 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 Phyllostine 中文名: 分子式:C7H6O4 度:98.5% 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit 2-Methoxystypandrone 中文名: 分子式:C14H12O5 度:98.0% 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISAKit Lapachol 中文名:拉帕醇 分子式: 度:98.0% 兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit 羥基松香酸 HPLC≥98% 5mg Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基,,,四甲氧基山山酮 HPLC≥98% 10mg MouseCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISA試劑盒小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氧乙酰旋覆花內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg Mousecarcinoembryonicaign,CEAELISA試劑盒小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ,,,'四羥基二苯乙烯葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T ”O沒食子酰基金絲桃苷 HPLC≥98% 20mg Mousecardioophln1,CT-1ELISA試劑盒小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)人參皂苷Rg HPLC≥98% 20mg Mousecatecholamine,CAELISA試劑盒小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T (R)原人參三醇 HPLC≥98% 20mg MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA試劑盒小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 去氧巨大戟萜醇 HPLC≥98% 20mg Mousec-fosELISA試劑盒小鼠c-fosELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T S羥基,二氧靈芝酸DM HPLC≥98% 5mg MouseCholecystokinin,CCKELISA試劑盒小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 羥基白樺酸 HPLC≥98% 20mg Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 小鼠主動(dòng)脈組織提取物兔子紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 度:98.0% 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 7-Amino-4-methylcoumarin 中文名:7-氨基-4-甲基香豆素 分子式:C10H9NO2 度:98.0% 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0% 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide 中文名: 分子式:C37H30BrFNP 度:98.0% 兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 |