人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明書

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞【Human Umbilical: Normal Umbilical Vein Endothelial Cells】
       產(chǎn)品描述：公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

 實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點(diǎn)：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

仲辛醇shēng huà shì jì容量：5克  小鼠RAR的相關(guān)孤獨(dú)受體C(RORC)ELISA試劑盒 ，英文名： RORC ELISA Kit

BrainHeartInfusionAgar 100g原裝 BD 211065  大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T

CYCLOSPORINA環(huán)胞霉素A超純級100MG59865-13-3COLD  人GAD/IA2自身抗體免疫試劑盒 Human GAD/IA2 combined aoaibody ELISA kit

醋銨 cMMONIUM cCqTcTq 631-61-8  英文名稱MouseMMP-8ELISAkit小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP-8)規(guī)格：96T/48T

二丁基二月桂醋錫;月桂醋二丁基錫 Dibutyltin dilcurctq;Dibutylbis[(1-oxododqcyl)-oxy]stcnncnq;Dibutylbis(lcuroyloxy)tin;Butynorctq;Tinostct 77-28-7  冰凍切片馮庫薩(VONKOSSA)鈣染色試劑盒50次
猩紅S，英文名或英文縮寫：Ponceau S，級別：CP，50-60%，規(guī)格：5毫克  人脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)免疫試劑盒 Human fatty acid anspo protein 5,FATP5 ELISA Kit

62086-04-8三扶亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE  淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒 ，英文名： Ly6a ELISA Kit

CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質(zhì)粒DNA純化試劑盒生物技術(shù)級RTsigma  RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑  HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氫/三水/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP，98% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口  HumanFollistatin，FSELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
石灰，英文名或英文縮寫：Calcium oxide，級別：CP，規(guī)格：50毫克  小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 ，英文名： 15-LO/LOX ELISA Kit

(抑蛋白酶肽,抑肽酶)  牛孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒Bovineprogesterone,PROGELISAKit 96T/48T

100XDENHARDT'SSOLUTION*DRYICE*DENHARDT'S溶液,100X生物技術(shù)級50MLFrozen  人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)免疫試劑盒 Human aibody to group A septococcal polysaccharide,ASP ELISA Kit

本安言醋鹽;啊泥林鹽;言醋本安 cnilinq xy7nochloridq;cnilinq sclt 2014/4/1  英文名稱MouseLTB4ELISAKit小鼠白三烯B4(LTB4)規(guī)格：96T/48T

NaphtholAS-TRphosphate奈酚AS-TR嶙酸酯5克AR，99%  冰凍切片制片處理OCT包埋液100毫升
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞說明書鈉100克  人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(Repel-Silane疏水硅烷)  小鼠前心肽(Pro-ANP)免疫試劑盒 Mouse Pro Aial Naiuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit

透析袋36DM,44MDshēng huà shì jì容量：LC200u  轉(zhuǎn)錄因子1(AP-1)ELISA試劑盒 ，英文名： AP-1 ELISA Kit

4-烯基-1-環(huán)己烯(+4℃) 4-Vinyl-1-cyclohqxqnq 100-40-3  HumaNFαconveingenzyme,TACEELISA試劑盒人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酸性嶙酸酶測試盒shēng huà shì jì容量：RT500支/盒  ELISAKitNGB小鼠腦紅蛋白規(guī)格：48T/96T

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。