小鼠心肌成纖維細胞提取物

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現(xiàn)貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

小鼠心肌成纖維細胞提取物【Mouse Heart: Normal Heart Fibroblast Derivatives】

小鼠心肌成纖維細胞提取物是從小鼠心肌成纖維細胞提取的，小鼠心肌成纖維細胞從正常小鼠心肌組織制備。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

馬源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法測/盒Ecdysterone ,22-monoacetonide227986

羊源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法測/盒Dyphylline4798二羥丙茶堿

牛源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法測/盒Duloxetine hydrochloride1364344鹽酸度洛西汀

豬源性成分快速鑒別試劑盒 實時熒光PCR法測/盒D-Tryptophan methyl ester hydrochloride1477

狐貍源性成分快速鑒別試劑盒 PCR法測/盒Drospirenone673927屈螺酮
L-Carnosine  中文名：L-肌肽  分子式：C9H14N4O3  度：99.0%  小鼠γ干擾素誘導蛋白elisa試劑盒   小鼠γ干擾素誘導蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠γ干擾素誘導蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠γ干擾素誘導蛋白試劑盒、小鼠γ干擾素誘導蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

N-Acetyl-D-tryptophan  中文名：N-乙酰基-D-色氨酸  分子式：C13H14N2O3  度：99.0%  小鼠γ干擾素elisa試劑盒   小鼠γ干擾素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠γ干擾素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠γ干擾素試劑盒、小鼠γ干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Allyl cinnamate  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2  度：98.0%  小鼠β內啡肽受體elisa試劑盒   小鼠β內啡肽受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內啡肽受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β內啡肽受體試劑盒、小鼠β內啡肽受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

2-Aminofluorene  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N  度：99.0%  小鼠β內啡肽elisa試劑盒   小鼠β內啡肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β內啡肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠β內啡肽試劑盒、小鼠β內啡肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

(1R,2S)-1-Amino-2-indanol  中文名：(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO  度：98.0%  小鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISAKit
旋覆花內酯 HPLC≥95% 20mg RatHeatShockFactor1,HSF1ELISAKit大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

表莪術烯酮 HPLC≥95% 20mg RatHeatShockFactor1,HSF1ELISA試劑盒大鼠熱休克因子1(HSF1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

表莪術醇 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein,HSP47ELISAKit大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

郁金二酮 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein,HSP47ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異原莪述烯醇 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(±)松屬素 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

槐黃烷酮C HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

O去甲基牛蒡子苷元 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲氧基異戊烯氧基香豆素 HPLC≥95% 20mg Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人參皂苷Rk HPLC≥98% 20mg Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠心肌成纖維細胞提取物瓜酸                 Emodin  518-82-1  中文名：大黃素  分子式：C15H10O5 

固（ALD）   96T/48T  Ornidazole  中文名：奧硝唑  分子式：C7H10ClN3O3 

固   英文名稱：   Aldosterone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Aldosterone  4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one  446292-10-0  中文名：  分子式：C14H17N3O4 

骨橋素/骨橋蛋白   英文名稱：   Osteopoin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OPN  Methyl β-D-fructofuranoside  13403-14-0  中文名：甲基-β-D-果糖苷  分子式：C7H14O6 

骨橋蛋白 ( Osteopoin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   德國 IBL  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。