PrimaCell™小鼠皮下脂肪細胞試劑盒 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | PrimaCell™小鼠皮下脂肪細胞試劑盒價格 | 英文名稱 | | 貨號 | EYX99618 |
實驗要點及說明; 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存; 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點; 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 小鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA試劑盒 ,英文名: FAS ELISA Kit 1617-53-4穗花杉雙黃酮規格 Amentoflavone 牛1酸果糖激酶(PFK)ELISA檢測試劑盒BovinePhosphofructokinase,PFKELISAKit 96T/48T 塔拉薩敏 talatisamine 人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)試劑盒 Human AFG3L2 ELISA kit 21082-33-7苔黑酚葡萄糖苷說明書 Orcinol glucosid 英文名稱Mouse(IL-1sRI)ELISAkit小鼠白介素1可溶性受體I(IL-1sRI)規格:96T/48T 11031-45-1檀香醇品牌 Santalol 冰凍切片組織AKT蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 479-98-1桃葉珊瑚苷規格 Aucubin 38412-46-3蘆薈寧品牌 Aloenin 載玻片細胞PAR-3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 38395-02-7告達亭苷元規格 caudatin 載玻片細胞PAR-2蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 38390-45-3脫水長春堿說明書 3',4'-Anhydrovinblastine 載玻片細胞PAR-1蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 38243-03-720(R)人參皂苷Rg3規格 20(R)Ginsenoside Rg3 載玻片細胞PAR-1蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 38226-86-7脫水羊藿素 Anhydroicaritin 載玻片細胞P38蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 稀酰胺1公斤 81907-61-1靈芝酸B說明書 Ganoderic acid B RatFibrinogen,FbgELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規格:96T/48T 38412-46-3蘆薈寧品牌 Aloenin 小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 ,英文名: TPA ELISA Kit 5610-40-2一葉萩堿規格 Securinine 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 96T/48T 511-96-6支脫皂苷元 Gitogenin 人抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒 human thyroid stimulating hormone receptor aidoby,Ab ELISA Kit 16562-13-3左旋千金藤啶堿說明書 L-Stepholidine PrimaCell™小鼠皮下脂肪細胞試劑盒價格51542-56-4人參皂苷Re Ginsenoside Re 植物蔗糖合成酶(sucrosesyhase)活性比色法定量檢測試劑盒20 514-47-6大戟二烯醇規格 Euphol 植物蔗糖1酸合成酶(sucrosephosphatesyhase)活性比色法定量檢測試劑盒20 51-34-3東莨菪堿規格 Scopolamine 植物源性飼料玉米試劑盒20 51330-27-9大豆皂苷Bb說明書 Soyasaponin BB 植物源性食品芝麻(sesame)試劑盒20 51317-08-9β-桉葉醇 β-Eudesmol 植物源性食品羽扇豆(lupine)試劑盒20 |