小鼠食管平滑肌細胞提取物培養

小鼠食管平滑肌細胞提取物【Mouse Esophageal: Normal Esophageal Smooth Muscle Cell Derivatives】

小鼠食管平滑肌細胞提取物是從小鼠食管平滑肌細胞提取的，小鼠食管平滑肌細胞從正常小鼠食管組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產品現貨，超低比價，產品名稱貨期短，價格優，售后齊全。

細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。
    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。 

馬布特羅 ELISA試劑盒96TMequindox132977乙酰甲喹

林可霉素ELISA試劑盒96TMepivacaine968甲哌卡因

萘啶酸 ELISA試劑盒96TMenthyl-(4-amino-oxoH-pyrimidin-yl)-[1,3]oxathiolane-carboxylic acid142

多拉菌素 ELISA試劑盒96TMenisdaurin677658

地塞米松 ELISA試劑盒96TMemantine hydrochloride4102鹽酸美金剛胺
L-Aspartic acid  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  小鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒           

3,3',4,4'-Benzophenone tetracarboxylic dianhydride  中文名：3,3',4,4'-二苯甲酮四甲酸二酐  分子式：C17H6O7  度：98.0%  小鼠白介素18(IL-18)ELISAKit  

1,2-Benzisothiazolin-3-one  中文名：1,2-苯并異噻唑-3-酮  分子式：C7H5NOS  度：98.0%  人凝血酶(TM)ELISAKit  

Benzoin methyl ether  中文名：安息香甲基醚  分子式：C15H14O2  度：98.0%  人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISAKit  

Benzanthrone  中文名：苯并蒽酮  分子式：C17H10O  度：98.0%  人可溶性白細胞抗原G(sHLA-G)ELISAKit
藍[pH指示劑]  Bromochlorophenol Blue  質量規格：pH指示劑 人補體蛋白4(C4)試劑盒 Human Compleme 4,C4 ELISA Kit

乙基橙[pH指示劑]  Ethyl Orange  質量規格：pH指示劑 人補體蛋白5(C5)試劑盒 Human Compleme 5,C5 ELISA Kit

4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T))  4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride  質量規格：>95.0%(T) 人補體蛋白9(C9)試劑盒 Human C9 ELISA Kit

DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑  DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole]  質量規格：用于蛋白質組分析，用于高效液相色譜標記，熒光染料，用于質譜的衍生化試劑 人補體片段3b受體(C3bR)試劑盒 Human C3bR ELISA Kit

2,3-萘二醛(>99.0%(GC))  2,3-Naphthalenedialdehyde  質量規格：>99.0%(GC) 人補體片段3c(C3c)試劑盒 Human Compleme fragme 3c,C3c ELISA Kit

DBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC))  DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]   質量規格：>98.0%(HPLC) 人補體片段3d(C3d)試劑盒 Human Compleme Fragme 3d,C3d ELISA Kit

N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC))  N-(1-Pyrenyl)maleimide  質量規格：>97.0%(HPLC) 人補體片段4d(C4d)試劑盒 Human Compleme Fragme 4d,C4d ELISA Kit

愛維莫潘  Alvimopan  質量規格：刪除；精神管制 人補體片斷3a(C3a)試劑盒 Human Compleme fragme 3a,C3a ELISA Kit

3-磺炳基十四烷基二甲甜菜堿  Myristyl sulfobetaine  質量規格：>98.0%,BR 人補體片斷3b(C3b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 96T/48T

3-磺炳基十六烷基二甲甜菜堿  3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB)  質量規格：>98%,BR 人補體片斷3b(C3b)試劑盒 Human Compleme fragme 3b,C3b ELISA Kit
小鼠食管平滑肌細胞提取物培養紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測試盒   Erythrocyte NADH high iron hemoglobin reductase test kit                 4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  中文名：4,5-二咖啡酰奎寧酸甲酯  分子式：C26H26O12 

紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒（比色法）  Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4  度：98.0%  關鍵詞： 

核轉錄因子NF-KB   英文名稱：   Nuclear anscription Factor NF-KB   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NF-KB  Tetracaine  94-24-6  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2 

河蟹5羥色胺   英文名稱：   5-Hydroxyyptamine   規格：   48T/96T   英文縮寫：   5-HT  Aspartame  22839-47-0  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5 

海藻糖含量試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣  Withanolide C  108030-78-0  中文名：醉茄內酯C  分子式：C28H39ClO7  度：97.5%  關鍵詞：  細胞毒活性; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫