小鼠氣管和支氣管組織提取物 說明書

小鼠氣管和支氣管組織提取物 【Mouse Airway: Normal Bronchial and Tracheal Derivatives】

氣管和支氣管是連接喉與肺之間的管道，均以“C”型的透明軟骨為支架，以保持其開放狀態(tài)，相鄰軟骨之間借韌帶連接。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠氣管和支氣管組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復(fù)蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

IPTG溶液5ml3-(5-(2-Aminopropyl)-cyanoindolin-yl)propyl benzoate (2R,3R),3-dihydroxysuccinate2394635

Kanamycin solution 卡那霉素溶液 mg/ml5×1ml3-(4-Chlorobutyl)indole-carbonitrile1436129

Leupeptin 0×亮抑酶肽溶液1ml 3-(3-Chloropropyl),3-dihydro,8-dimethoxyH-benzazepin-one851759

Lysozyme solution 溶菌酶 5mg/ml5×1ml3-(2-Benzothiazolylthio)propionic acid4763-(2-苯并噻唑基硫代)

N6-異戊烯基腺嘌呤核苷溶液（2ip riboside）5×1ml3-(1-Piperazinyl),2-benzisothiazole876917
Desloratadine  中文名：脫羧氯雷他定  分子式：C19H19ClN2  度：98.0%  小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 ADI

5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  中文名：  分子式：C7H9N3O3  度：98.0%  小鼠類胰島素樣生長因子 -1 (mouse IGF-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

5-Ami-(2-hydroxyethyl)pyrazole  中文名：  分子式：C5H9N3O  度：98.0%  小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名：  分子式：C6H5N3  度：98.0%  小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender  

Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%  小量DNA產(chǎn)物化試劑盒   Small DNA product purification kit
羥基,去氫柳杉酚 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧巴馬亭 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP450,CYP450ELISA試劑盒大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

表丹參隱螺內(nèi)酯 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP4502E1,CYP2E1ELISAKit大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鼠尾草酚酮 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP4502E1,CYP2E1ELISA試劑盒大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

表丹參螺縮酮內(nèi)脂 HPLC≥95% 20mg RatCytosolicPhospholipaseA2,cPLA2ELISAKit大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

去氫丹參酮IIA HPLC≥95% 20mg RatCytosolicPhospholipaseA2,cPLA2ELISA試劑盒大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鼠尾草酮 HPLC≥95% 20mg RatDCspecificiercellularadhesionmolecule3-grabbingnoniegrin,DC-SIGN/CD209ELISAKit大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)規(guī)格：96T/48T

丹參醇A HPLC≥95% 20mg RatDCspecificiercellularadhesionmolecule3-grabbingnoniegrin,DC-SIGN/CD209ELISA試劑盒大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結(jié)合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)規(guī)格：96T/48T

表丹參醇 A HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit大鼠脫氫表雄同(DHEA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化天竺葵素,O雙葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISA試劑盒大鼠脫氫表雄同(DHEA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠氣管和支氣管組織提取物 說明書兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S 

兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISAKit     7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  160129-45-3  中文名：  分子式：C10H10ClNO 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7α-Hydroxystigmasterol  64998-19-2  中文名：7α-羥基豆甾醇  分子式：C29H48O2 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7α-Hydroxysitosterol  34427-61-7  中文名：7α-羥基谷甾醇  分子式：C29H50O2 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒     7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  中文名：  分子式：C29H46O3  度：97.5%