小鼠氣管和支氣管組織提取物 說明書

小鼠氣管和支氣管組織提取物 【Mouse Airway: Normal Bronchial and Tracheal Derivatives】

氣管和支氣管是連接喉與肺之間的管道，均以“C”型的透明軟骨為支架，以保持其開放狀態，相鄰軟骨之間借韌帶連接。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠氣管和支氣管組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。
cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。
蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。 

實驗要點及說明；

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

運輸和保存；

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

操作要點；

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

IPTG溶液5ml3-(5-(2-Aminopropyl)-cyanoindolin-yl)propyl benzoate (2R,3R),3-dihydroxysuccinate2394635

Kanamycin solution 卡那霉素溶液 mg/ml5×1ml3-(4-Chlorobutyl)indole-carbonitrile1436129

Leupeptin 0×亮抑酶肽溶液1ml 3-(3-Chloropropyl),3-dihydro,8-dimethoxyH-benzazepin-one851759

Lysozyme solution 溶菌酶 5mg/ml5×1ml3-(2-Benzothiazolylthio)propionic acid4763-(2-苯并噻唑基硫代)

N6-異戊烯基腺嘌呤核苷溶液（2ip riboside）5×1ml3-(1-Piperazinyl),2-benzisothiazole876917
Desloratadine  中文名：脫羧氯雷他定  分子式：C19H19ClN2  度：98.0%  小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 ADI

5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  中文名：  分子式：C7H9N3O3  度：98.0%  小鼠類胰島素樣生長因子 -1 (mouse IGF-1)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

5-Ami-(2-hydroxyethyl)pyrazole  中文名：  分子式：C5H9N3O  度：98.0%  小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名：  分子式：C6H5N3  度：98.0%  小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a )   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender  

Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%  小量DNA產物化試劑盒   Small DNA product purification kit
羥基,去氫柳杉酚 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒規格：96T/48T

氧巴馬亭 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP450,CYP450ELISA試劑盒大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒規格：96T/48T

表丹參隱螺內酯 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP4502E1,CYP2E1ELISAKit大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鼠尾草酚酮 HPLC≥95% 20mg RatcytochromeP4502E1,CYP2E1ELISA試劑盒大鼠細胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

表丹參螺縮酮內脂 HPLC≥95% 20mg RatCytosolicPhospholipaseA2,cPLA2ELISAKit大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規格：96T/48T

去氫丹參酮IIA HPLC≥95% 20mg RatCytosolicPhospholipaseA2,cPLA2ELISA試劑盒大鼠胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規格：96T/48T

鼠尾草酮 HPLC≥95% 20mg RatDCspecificiercellularadhesionmolecule3-grabbingnoniegrin,DC-SIGN/CD209ELISAKit大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)規格：96T/48T

丹參醇A HPLC≥95% 20mg RatDCspecificiercellularadhesionmolecule3-grabbingnoniegrin,DC-SIGN/CD209ELISA試劑盒大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子(DC-SIGN/CD209)規格：96T/48T

表丹參醇 A HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit大鼠脫氫表雄同(DHEA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

氯化天竺葵素,O雙葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISA試劑盒大鼠脫氫表雄同(DHEA)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠氣管和支氣管組織提取物 說明書兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   兔子可溶性CD40配體試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子可溶性CD40配體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。     8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S 

兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISAKit     7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  160129-45-3  中文名：  分子式：C10H10ClNO 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  7α-Hydroxystigmasterol  64998-19-2  中文名：7α-羥基豆甾醇  分子式：C29H48O2 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒   規格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  7α-Hydroxysitosterol  34427-61-7  中文名：7α-羥基谷甾醇  分子式：C29H50O2 

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒     7α-Methoxy-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-dien-3β-ol  中文名：  分子式：C29H46O3  度：97.5%