大鼠膀胱平滑肌細胞說明書

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大鼠膀胱平滑肌細胞【Rat Bladder：Normal Bladder Smooth Muscle Cells】

 產(chǎn)品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩(wěn)定。在公司部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

實驗事項：

1. 試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結(jié)合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。
3.   孵育：為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發(fā)；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數(shù)。
5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。
    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準確性。
    如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數(shù)。

鹽酸鹽25克2～8℃  鋅α2糖蛋白(AZGP1)ELISA試劑盒 ，英文名： AZGP1 ELISA Kit

CesiumChloride 10g/25g/50g/500g原裝 Sigma C4036  Mousehydroxyproline,HypELISA試劑盒小鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無水錄化鈰shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10*10mg/支  ELISAKitCO兔子皮質(zhì)同/腎上腺同規(guī)格：48T/96T

軟骨速二糖Δdi-6S內(nèi)鹽(-20℃) cLPHc-DqLTc-Uc-[1->3]-GcLNcC-6S wo7ium ScLT 13613-7-4  ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

麥芽糖一水合物 D-(+)-Mcltosq monohydrctq 6363-23-7  人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酸銫5克RT，避光  組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)ELISA試劑盒 ，英文名： HDAC2 ELISA Kit

(-)-Arabinose  Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISA試劑盒人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄代磺酚Cshēng huà shì jì容量：500克  ELISAKitPSA小鼠前列腺特異性抗原規(guī)格：48T/96T

檸康醋 Citrcconic ccid 498-3-7  humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKit人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

1.4-環(huán)己二烯 Cyclohqxc-1,4-diqnq 68-41-1  人1脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
偏硼酸，英文名或英文縮寫： borate monohydrate，級別：BR，98%，規(guī)格：500克  Human heparanase (HPA) ELISA Kit 人乙酰肝素酶(HPA)ELISA試劑盒

AMVReverseTranscriptase 300u/1000u Promega原裝  Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAVELISAKit 人抗甲型肝炎病毒IgM抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Haptoglobinfrompooledhumanplasma結(jié)合珠蛋白100克高純，50u/mg  Humanheat-labileeerotoxinBsubunit,LTBELISA試劑盒人不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

安替比林;;;二基本基吡坐同 cntipyrinq;Phqnyl diMqthylpyrczolonq;1,2-Dixy7,5-diMqthyl-2-phqnyl-3H-pyrczol-3-onq;2,3-DiMqthyl-1-phqnyl-3-pyrczolin-5-onq 60-80-0  組織鈣蛋白酶(CALPAIN)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Penicillin&Streptomycin&AmphotericinBsolution,γ-Irradiated青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液750U高純，90%，適合電泳  HumanMaixmetalloproteinase10,MMP-10ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
大鼠膀胱平滑肌細胞說明書麗春紅2R100克2～8°C  RatBonemorphogeneticprotein4,BMP-4ELISA試劑盒大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

POPSO 10g/100g原裝 Sigma P3405  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTXⅠ ELISA Kit

對本基酚，英文名或英文縮寫：4-xy7noxybipxenyl，級別：CP，95%，規(guī)格：500克  人新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA檢測試劑盒HumanNeonatalThyroxine,NN-T4ELISAKit 96T/48T

二醋6-羧基熒光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6  大鼠氧化酶(DAO)免疫試劑盒 Rat diamine oxidase,DAO ELISA Kit

6,6-二甲基-2-亞甲基-二環(huán)[3.1.1]-庚烷，英文名或英文縮寫：β-Pinen，級別：BR，規(guī)格：25克  CLIAKitfoXB2ELISAKit大鼠血栓素B2規(guī)格：48T/96T

注意事項：

1. 接收到，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。