小鼠胃粘膜上皮細胞提取物【Mouse Gastric: Normal Gastric Mucosal Epithelial Cell Derivatives】 小鼠胃粘膜上皮細胞提取物是從小鼠胃粘膜上皮細胞提取的,小鼠胃粘膜上皮細胞從正常小鼠胃粘膜組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產品名稱 | 小鼠胃粘膜上皮細胞提取物說明書 | 英文名稱 | Mouse Gastric: Normal Gastric Mucosal Epithelial Cell Derivatives | 貨號 | EYX99154 |
實驗要點及說明: 1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運輸和保存: 視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。 1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。 2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。 一.培養基及培養凍存條件準備: 1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。 2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
操作要點: 1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。 麻疹病毒與風疹病毒雙重實時熒光PCR檢測試劑盒TTroxerutin855曲克蘆丁 水痘-帶狀皰疹病毒核酸實時熒光PCR檢測試劑盒TTropisetron hydrochloride58262鹽酸托烷司瓊 輪狀病毒(C組)實時熒光PCR檢測試劑盒TTropicamide185托吡卡胺 輪狀病毒(B組)實時熒光PCR檢測試劑盒TTrityl candesartan1394812 輪狀病毒A/諾如病毒GI/諾如病毒GII三重實時熒光PCR檢測試劑盒TTrityl candesartan cilexetil17919 L-Aspartic acid 56-84-8 中文名:L-天門冬氨酸 分子式:C4H7NO4 度:98.0% 關鍵詞 小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISAKit L-Ascorbic acid 50-81-7 中文名:L-抗壞血酸 分子式:C6H8O6 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKit Lapatinib 231277-92-2 中文名:拉帕替尼 分子式:C29H26ClFN4O4S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 Lapachol 84-79-7 中文名:拉帕醇 分子式: 度:98.0% 關鍵詞: 抗炎; 抗菌; 抗腫瘤; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒 Lansoprazole 103577-45-3 中文名:蘭索拉唑 分子式:C16H14F3N3O2S 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒 化新斯的明(標準品) Neostigmine bromide 質量規格:>98%,標準品 小鼠補體成分4(C4)ELISA試劑盒 ,英文名: C4 ELISA Kit 木蘭脂素 Magnolin 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠補體成分4a(C4a)ELISA試劑盒 ,英文名: C4a ELISA Kit 消旋山莨菪堿 Racanisodamine 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠補體成分4b(C4b)ELISA試劑盒 ,英文名: C4b ELISA Kit 磺胺間二甲氧嘧啶鈉 Sulfadimethoxine salt 質量規格:>98% 小鼠補體成分5(C5)ELISA試劑盒 ,英文名: C5 ELISA Kit 磺胺間二甲氧嘧啶鈉(標準品) Sulfadimethoxine salt 質量規格:>98%,標準品 小鼠補體成分5a(C5a)ELISA試劑盒 ,英文名: C5a ELISA Kit 毛地黃毒苷配基 Digitoxigenin 質量規格:>97.0%(LC),* 小鼠補體成分5a受體1(C5aR1)ELISA試劑盒 ,英文名: C5aR1 ELISA Kit 柯諾辛堿 Corynoxine 質量規格:HPLC≥95%,標準品 小鼠補體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 烏拉地爾(標準品) Urapidil 質量規格:HPLC>98%,標準品 小鼠補體蛋白3(C3)ELISA檢測試劑盒MouseCompleme3,C3ELISAKit 96T/48T 夫西地酸鈉 Fusidate 質量規格:>97%,BR 小鼠補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 ,英文名: C3 ELISA Kit 夫西地酸鈉(標準品) Fusidate 質量規格:HPLC≥98%,標準品 小鼠補體蛋白4(C4)ELISA檢測試劑盒MouseCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T 小鼠胃粘膜上皮細胞提取物說明書化鈣 100g Androstenone hydrazone 中文名:雄酮腙 分子式:C19H30N2O 度:98.0% 化銨 100g Pregabalin 148553-50-8 中文名:普瑞巴林 分子式:C8H17NO2 度:98.0% 關鍵詞: 猴載脂蛋白B100elisa試劑盒 猴載脂蛋白B100試劑盒 規格型號:96T/48T 猴載脂蛋白B100試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:猴載脂蛋白B100試劑盒、猴載脂蛋白B100elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone 28657-75-2 中文名:6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮 分子式:C9H9NO3 猴載脂蛋白A1elisa試劑盒 猴載脂蛋白A1試劑盒 規格型號:96T/48T 猴載脂蛋白A1試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:猴載脂蛋白A1試劑盒、猴載脂蛋白A1elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 6-Ami-methyluracil 中文名: 分子式:C5H7N3O2 度:98.0% 猴胰島素elisa試劑盒 猴胰島素試劑盒 規格型號:96T/48T 猴胰島素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:猴胰島素試劑盒、猴胰島素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 6-Ami-methyluracil 中文名: 分子式:C5H7N3O2 |