大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物【Rat Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells Derivatives】 大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物是從大鼠原代嗅鞘細(xì)胞提取的,大鼠原代嗅鞘細(xì)胞從正常大鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物價(jià)格 | 英文名稱(chēng) | Rat Brain: Normal Olfactory Bulb Ensheathing Cells Derivatives | 貨號(hào) | EYX99276 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明: 1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。 運(yùn)輸和保存: 視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。 1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。 2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。 一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備: 1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。 2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
操作要點(diǎn): 1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。 3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。 5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。 大腸桿菌BL211mlAllopurinol31別嘌醇 巴斯德畢赤酵母X331mlAllitol4884蒜糖醇 畢赤酵母GS1151mlAlbendazole549651阿苯達(dá)唑 畢赤酵母SMD11681mlAgomelatine1381126阿戈美拉汀 枯草芽孢桿菌WB01mlAflatoxin B111625黃曲霉毒素B1 Formestane 中文名:福美司坦 分子式:C19H26O3 度:98.0% 小鼠IgG(mouse IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Chlorotestosterone acetate 中文名:醋酸氯睪酮 分子式:C21H29ClO3 度:98.0% 小鼠IgM(mouse IgM) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Estra-4,9-diene-3,17-dione 中文名:甲基雙烯雙酮 分子式:C18H22O2 度:98.0% 小鼠白介素-1a(mouse IL-1a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methoxydienone 中文名:沃氏物 分子式:C20H28O2 度:98.0% 小鼠白介素-1b(mouse IL-1b) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methasterone 中文名:甲基屈他雄酮 分子式:C21H34O2 度:98.0% 小鼠IgE 英文名稱(chēng): immunoglobulin E 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): IgE 司班80;司盤(pán)80 Span* 80 質(zhì)量規(guī)格:BR 等電聚焦蛋白電泳(IEF)2倍上樣緩沖液10毫升 聚乙二醇1000 PEG 1000 質(zhì)量規(guī)格:分子量1000 等電聚焦蛋白電泳(IEF)標(biāo)準(zhǔn)補(bǔ)水緩沖液50毫升 胰蛋白胨(BD) Tryptone 質(zhì)量規(guī)格:BD 211705 等電聚焦蛋白電泳(IEF)強(qiáng)化補(bǔ)水緩沖液50毫升 丹磺酰氯 DNSCl, Dansyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98% 等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5 N-乙基順丁烯二 N-Ethylmaleimide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 等位基因特異性表達(dá)分析試劑盒5 碳酸氫鉀(AR) Potassium bicarbonate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100 十二烷基磺酸鈉(BR) dodecanesulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50 茶堿 Theophylline 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 低鹽LB細(xì)菌培養(yǎng)液500毫升 纖維素酶 Cellulase 質(zhì)量規(guī)格:>2000U/mg 地塞米松細(xì)胞脂肪誘導(dǎo)生成比色法定量檢測(cè)試劑盒20 硫酸軟骨素 Chondroitin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 地生蘭(terresial)播種培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 大鼠嗅鞘細(xì)胞提取物價(jià)格十六烷基-二甲基-乙基-溴化銨 50g 3-O-Methyl-3-methoxymaxterone 92282-70-7 中文名:3-O-甲基-3-甲氧基-5α-雄烷二醇 分子式:C21H36O3 度:98.0% 生長(zhǎng)因子 英文名稱(chēng): Human Growth Factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GF 3-O-Benzyl estrone 858-98-0 中文名:3-O-芐基雌酚酮 分子式:C25H28O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 生長(zhǎng)相關(guān)因子 α(GRO α) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Pentoxyverine 23142-01-0 中文名:枸櫞酸噴托維林 分子式:C26H39NO10 度:98.0% 生長(zhǎng)相關(guān)因子 (GRO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Pentoxyverine 中文名:枸櫞酸噴托維林 分子式:C26H39NO10 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因a 英文名稱(chēng): growth-regulated oncogene a 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): GRO a 3-O-Acetylandrostenone hydrazone 122914-94-7 中文名:3-O-乙酰基雄酮腙 分子式:C21H32N2O2 度:98.0% |