我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品貨期短,價格優,售后齊全。 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 | PrimaCell™人腎系膜細胞試劑盒價格 | | EYX99517 |
PrimaCell™人腎系膜細胞試劑盒 總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 細胞培養方法; 1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化; ③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止; ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清; ⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基; ⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。 2、細胞復蘇: ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。 ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。 3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種 ①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶) ②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化; ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞; ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
實驗事項; 1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。 2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內,如標本數量多,推薦使用多道移液器加樣。 3. 孵育:為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發;洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。 4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響后的酶標儀讀數。 5. 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用,并使用相應的稀釋液配制,不能混淆。請確配置標準品及工作液,盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10μl),以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差;請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。 6. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請提前加入終止液終止反應,避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。 7. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。 Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 1257-08-5表兒茶素沒食子酸酯品牌 ECG 小鼠組蛋白脫乙酰基酶4(HDAC4)ELISA試劑盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit 989-51-5表沒食子兒茶素沒食子酸酯規格 EGCG 山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測試劑盒GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T 970-74-1表沒食子兒茶素 EGC 犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)試劑盒 Canine ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit 18642-23-4補骨脂定說明書 psoralidin 英文名稱Mouse8-hydroxy-2-deoxyguanosineELISAKit小鼠8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)規格:96T/48T 53947-92-5補骨脂寧品牌 corylin 85643-19-2仙茅苷 Curculigoside 組織MUSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 85026-55-7絡緦說明書 Rosin 組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 84954-93-8絡塞琳 Rosarin 組織MET激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 84954-92-7絡塞維品牌 Rosavin 組織MAPKAPKINASE3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 848784-87-24補充中3規格 Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[ D-glucopyranosyl(1→4)[ L-rhamnopyranosyl) (1→2)-L-arabinopyranosyl]oxy], (3,4)-) 組織MAPKAPKINASE2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20 RatFolicacid,FAELISA試劑盒大鼠葉酸(FA)ELISA試劑盒規格:96T/48T 33570-04-6白果內酯 Bilobalide 小鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 ,英文名: CTSD ELISA Kit 28095-18-3白花前胡醇說明書 Peucedanol 綿羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T 81740-07-0白花前胡乙素品牌 Praeruptorin B 犬胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT 83382-71-2白花前胡丙素規格 Praeruptorin C 英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT小鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規格:96T/48T 白花前胡丁素 Praeruptorin D PrimaCell™人腎系膜細胞試劑盒價格14215-86-2獐牙菜苷說明書 Sweroside 英文名稱RatHAELISAKIT大鼠透明質酸(HA)規格:96T/48T 14215-86-2獐牙菜苷品牌 Sweroside 英文名稱RatGSH-PXELISAKit大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)規格:96T/48T 14197-60-5人參皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 英文名稱RatGRHELISAKit大鼠促生長激素釋放激素(GRH)規格:96T/48T 1415-73-2蘆薈苷說明書 Aloin 英文名稱RatGRHELISAKit大鼠促生長激素釋放激素(GRH)規格:96T/48T 14144-06-0地索苷說明書 Diosgenin glucoside 英文名稱Ratgp130ELISAKIT大鼠gp130規格:96T/48T 注意事項; 1. 接收到,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。 4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。 |