小鼠主動脈內皮細胞培養

小鼠主動脈內皮細胞【Mouse Aorta：Normal Aortic Endothelial Cells】
       產品描述：公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

 實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

操作要點：

1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。

乙酰乙酸shēng huà shì jì容量：1公斤  Humanangiostatin,ANGELISA試劑盒人血管抑素/血管穩定蛋白(ANG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

633-96-5酸性橙 7Acid Orange 7  HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2ELISAKit人腺苷三結合盒轉運體G2(ABCG2)ELISA試劑盒規格：96T/48T

脂質體2000，英文名或英文縮寫：Lipofectamine 2000 Transfection Reagent，級別：AR，99%，規格：5克  人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

蠶蛹蛋白胨 Silkworm chrysalis protein peptone Null 250G 通用試劑  兔子肝細胞生長因子(HGF)免疫試劑盒 Rabbit hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

二流代赤蘚醇 Dithioqrythritol　(DTq) 689-68-8  三角形四肽重復蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TTC1/TPR1 ELISA Kit
微量可調移液器P200shēng huà shì jì容量：5克  HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規格：96T/48T

PH緩沖液　PH9.0(20℃)NA  轉基因產品35S試劑盒20次

D-谷酰胺10克RT  HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒規格：96T/48T

二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑  小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1B ELISA Kit

拂化 litxium fluoridq 7789/4/4  魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA檢測試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
曲酸shēng huà shì jì容量：100克  組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

PonceauS 10g/100g原裝 Amresco 0860  HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

秋水仙胺1公斤  小鼠Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒 ，英文名： CTX-Ⅰ ELISA Kit

6-二基安基嘌呤≥98%(-20℃) 6-Dimqthylcminopurinq 938-22-6  植物維生素B12(VB12)ELISA檢測試劑盒PlaVitaminB12,VB12ELISAKit 96T/48T

TAEBUFFER,50XTAE緩沖液, 50X超純級20LRT  人CC趨化因子7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)免疫試劑盒 Human CCL7 ELISA kit
小鼠主動脈內皮細胞培養錄化鈷shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISA試劑盒人抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

2-溴2-BroMotolue  HumanBeta-naphthol，β-NphELISAKit人β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒規格：96T/48T

十一烯酸shēng huà shì jì容量：RT，避光25克  人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

苯基基硫醚 Phenyl vinyl sulfide,98% 1822-73-7 1G 通用試劑  兔子白介素13(IL-13)免疫試劑盒 Rabbit ierleukin 13,IL-13 ELISA Kit

二基錄硅烷;錄二基硅烷 DiMqthylchlorosilcnq; DiMqthylsilyl chloridq; DMCS; DMSC; 1066-32-9  熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP-90 ELISA Kit

運輸和保存：
視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿*培養基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。